異基因造血干細(xì)胞移植后急性移植物抗宿主病過(guò)程中T細(xì)胞趨化和遷移相關(guān)指標(biāo)的表達(dá)研究.pdf

1、研究目的：急性移植物抗宿主病(aGVHD)是異基因造血干細(xì)胞移植(allo-HSCT)后的主要并發(fā)癥，效應(yīng)細(xì)胞遷移到靶組織是發(fā)生aGVHD的必需環(huán)節(jié)。多種趨化因子受體、整合素β7、選擇素L、粘附分子CD11a/CD54與1磷酸鞘氨醇受體1(S1P1)可能在其中發(fā)揮作用。本研究的目的在于探索T細(xì)胞遷移在aGVHD中的作用機(jī)制，為臨床尋找具有早期預(yù)警、動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)及指導(dǎo)治療aGVHD的指標(biāo)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為尋找治療aGVHD的新方法提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

2、 研究方法：本研究以allo-HSCT后受者造血重建后100天內(nèi)不同時(shí)期的血細(xì)胞為研究對(duì)象，通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)監(jiān)測(cè)外周血淋巴細(xì)胞CCR7、CD45RA、CCR4、CCR9、CXCR3、CCR5及整合素β7、CD25、選擇素L、粘附分子CD11a/CD54的抗原表達(dá)情況，計(jì)算各指標(biāo)百分比及絕對(duì)值。以磁分選方法純化CD4+T淋巴細(xì)胞，以實(shí)時(shí)定量PCR的方法檢測(cè)CD4純化細(xì)胞中S1P1及整合素β7的mRNA表達(dá)水平。收集臨床資料，根據(jù)臨床

3、診斷分為aGVHD及無(wú)aGVHD組，根據(jù)aGVHD發(fā)生部位分為單純皮膚組、單純腸道組、單純肝臟組、混合部位組，根據(jù)腹瀉原因分為腸道GVHD組、炎性腹瀉受者組及炎性腹瀉志愿者組，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 研究結(jié)果： ①aGVHD組較無(wú)aGVHD組Tnaive、TCM百分比及絕對(duì)值升高，TEM、TTD百分比及絕對(duì)值下降，CCR7表達(dá)百分比及絕對(duì)值上調(diào)，CD8+細(xì)胞中CD8+CCR7+表達(dá)量明顯上升。兩組間T細(xì)胞、NK細(xì)胞、B細(xì)胞、C

4、D45RA及CD4+CCR7+/CD4+百分比及絕對(duì)值無(wú)顯著性差異。 ②aGVHD組較無(wú)aGVHD組間CCR4及其在CD4+與CD8+細(xì)胞中的表達(dá)百分比及絕對(duì)值、CCR9百分比、CCR5百分比及絕對(duì)值、CCR5在CD4+細(xì)胞及CD8+細(xì)胞中的表達(dá)百分比均顯著上升。aGVHD組與無(wú)aGVHD組間CXCR3百分比及絕對(duì)值均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 ③aGVHD組較無(wú)aGVHD組間整合素β7及其在CD4+與CD8+細(xì)胞中的表達(dá)百分比及絕

5、對(duì)值均顯著上升，且具有部位特異性，肝臟、腸道部位GVHD者較單純皮膚GVHD明顯升高。腸道GVHD組與炎性腹瀉受者組組間整合素β7表達(dá)百分比及絕對(duì)值及其在CD4+與CD8+細(xì)胞中的表達(dá)百分比均具有顯著性差異，腸道GVHD組＞炎性腹瀉志愿者組＞炎性腹瀉受者組。 ④aGVHD組較無(wú)aGVHD組間CD25及CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞百分比及絕對(duì)值均顯著上升。腸道GVHD組與炎性腹瀉受者組組間CD25百分比及絕對(duì)值、CD4+CD25

6、+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞百分比、CD54百分比及其在CD8+細(xì)胞中的表達(dá)百分比絕對(duì)值顯著升高。兩組間CD11a及CD62L表達(dá)百分比及絕對(duì)值無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 ⑤aGVHD組較無(wú)aGVHD組間S1P1及整合素β7的mRNA表達(dá)顯著性上調(diào)。 結(jié)論：allo-HSCT后aGVHD發(fā)生過(guò)程中T細(xì)胞中表達(dá)的CCR7、CCR4、CCR9、CCR5、整合素β7、CD25、CD54及S1P1均明顯上調(diào)。以上信號(hào)途徑可能成為預(yù)防和治療aGVHD的新靶