B淋巴細(xì)胞刺激因子對(duì)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株RPMI8226生長(zhǎng)調(diào)控的研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文B淋巴細(xì)胞刺激因子對(duì)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株RPMI8226生長(zhǎng)調(diào)控的研究姓名：黃晨申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：高玉環(huán)20090301中文摘要2MTT法檢測(cè)BLys對(duì)RPMl8226細(xì)胞生長(zhǎng)的影響21rHuBLyS對(duì)RPMl8226細(xì)胞的增殖實(shí)驗(yàn)取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的RPMl8226細(xì)胞懸液，隨機(jī)分成陰性對(duì)照組、不同劑量BlyS組。陰性對(duì)照組加入1001tl細(xì)胞培養(yǎng)液，不同濃度的BlyS組終濃度分別為01、O5、1

2、0、30、509l／ml，每組3個(gè)平行孔。37℃、5％C02的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，分別于24、48、72小時(shí)之后，每孔加入5mg／mlMTT溶液209l，37。C孵育4h，然后離心培養(yǎng)板，小心吸去上清，每孔加入1509l二甲基亞砜(DMSO)，振蕩器充分振蕩后于酶標(biāo)儀570nm處測(cè)各孔吸光度值。22BlyS拮抗硼替佐米作用的實(shí)驗(yàn)取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的RPMl8226細(xì)胞懸液，隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，對(duì)照組加入1001tl細(xì)胞培養(yǎng)液，實(shí)驗(yàn)組第1組加入1

3、00tlBlyS溶液使終濃度達(dá)到2099／ml；第2組加入硼替佐米使終濃度達(dá)1099／ml；第3組加入BlyS溶液硼替佐米終濃度分別為20Irtg／ml、10tg／ml。每組3個(gè)平行孔，48小時(shí)后以上述同樣的MTT法測(cè)量各孔的光吸收值。3流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)BLys對(duì)RPMl8226細(xì)胞細(xì)胞凋亡的影響取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的RPMl8226細(xì)胞1105／ml，以不同濃度BLys處理48h后，收集細(xì)胞，用預(yù)冷4℃PBS洗三遍后，加入碘化丙碇(PI：50m