大黃和酒大黃活血祛瘀藥理作用部位的HPLC指紋圖譜研究.pdf

1、大黃通過酒炙，增強(qiáng)活血祛瘀作用，在千百年臨床實(shí)踐中，酒大黃多用于活血處方中。本論文在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，采用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)在活血祛瘀部位、藥理實(shí)驗(yàn)和指紋圖譜三方面，對(duì)大黃及炮制品酒大黃進(jìn)行研究。以大黃酒炙增強(qiáng)活血祛瘀作用為切入點(diǎn)，通過“中藥炮制-藥性理論-化學(xué)成分-藥理作用-指紋圖譜”的綜合研究模式。研究酒大黃具有活血祛瘀藥理作用的有效部位，并對(duì)該作用部位進(jìn)行指紋圖譜的研究。這對(duì)闡明和證實(shí)中藥炮制理論，確保中藥飲片療效，指導(dǎo)飲片廠正確加工

2、炮制大黃，具有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義。為酒大黃飲片質(zhì)量控制體系的建立提供部分科學(xué)依據(jù)。 按《中國藥典》2005年版一部相關(guān)要求對(duì)大黃和酒大黃同一批藥材三組樣品進(jìn)行平行測定。結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)藥材符合藥典的要求，為合格藥材。采用試管法和濾紙法，對(duì)大黃和酒大黃的蒸餾水、95％乙醇、石油醚提取物進(jìn)行研究，通過與多種指示劑和顯色劑的沉淀反應(yīng)或顏色反應(yīng)，結(jié)果表明大黃和酒大黃中含有氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽、糖類、皂甙、酚類、鞣質(zhì)、有機(jī)酸、黃酮類、香豆素

3、、葸醌、萜類、甾體、揮發(fā)油、油脂等化學(xué)成分。未發(fā)現(xiàn)生物堿、強(qiáng)心甙等成分。 采用系統(tǒng)溶劑法分離、提取大黃和酒大黃不同極性的提取部位。依次用氯仿、正丁醇、50％乙醇和水作為提取溶劑進(jìn)行提取。提取條件：加10倍量溶劑，提取兩次，每次提取1小時(shí)，對(duì)提取液進(jìn)行過濾、濃縮，最后得到相應(yīng)溶劑的提取部位。 通過動(dòng)物藥理實(shí)驗(yàn)，應(yīng)用活血祛瘀相關(guān)的藥效學(xué)指標(biāo)，證明大黃經(jīng)酒制后，增強(qiáng)了活血祛瘀功效，并篩選酒大黃的活血祛瘀藥理作用的部位為50％乙

4、醇提取物。 確定了酒大黃活血祛瘀藥理作用部位HPLC指紋圖譜條件。色譜儀：LC-20AB高效液相色譜儀；色譜柱：Krosmosil C18(4.6mm×200mm，5μm)；流動(dòng)相：A(0.1％磷酸甲醇)：B(0.1％磷酸水)為(82:18)；流速：1.0ml/min：流程：35min；檢測波長：254nm；柱溫：室溫。 首次初步建立酒大黃活血祛瘀藥理作用部位HPLC指紋圖譜。確定7個(gè)峰作為特征峰組成其指紋圖譜。通過考察

5、六個(gè)不同企業(yè)的酒大黃活血祛瘀藥理作用部位HPLC指紋圖譜，建立了標(biāo)準(zhǔn)HPLC指紋圖譜。通過與對(duì)照品比較，確定了酒大黃活血祛瘀藥理作用部位HPLC指紋圖譜中三個(gè)色譜峰的歸屬，分別是：大黃酸、大黃素和大黃酚。 經(jīng)中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)軟件計(jì)算，10批同一生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的不同批次酒大黃活血祛瘀藥理作用部位HPLC指紋圖譜相似度均在0.98以上?？疾煳鍌€(gè)不同生產(chǎn)廠家的酒大黃活血祛瘀藥理作用部位HPLC指紋圖譜，整體輪廓均符合共有特征，