糖對(duì)鐵皮石斛愈傷組織生長(zhǎng)及其生化特性的影響.pdf

1、本文以鐵皮石斛(Dendrobium candidum Wall.ex Lindl)原球莖為外植體誘導(dǎo)出的愈傷組織在黑暗中繼代培養(yǎng)2次后的胚性愈傷組織為實(shí)驗(yàn)材料，研究各種糖對(duì)愈傷組織生長(zhǎng)及生化特性的影響。主要結(jié)果如下： 1.以繼代2次的胚性愈傷組織為材料，研究了蔗糖、果糖、海藻糖、麥芽糖和乳糖對(duì)愈傷組織生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明：蔗糖、果糖、海藻糖有利于愈傷組織的生長(zhǎng)，它們的最適濃度分別為3％、2％、3％；麥芽糖次之，其最適濃度為2％

2、；乳糖最不利于愈傷組織生長(zhǎng)，其最適濃度為0.5％；果糖和蔗糖對(duì)愈傷組織生長(zhǎng)的作用啟動(dòng)時(shí)間較早，而海藻糖則較晚，海藻糖和果糖對(duì)愈傷組織生長(zhǎng)的作用持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，而乳糖、蔗糖和麥芽糖的作用持續(xù)時(shí)間則較短；各種糖對(duì)愈傷組織增殖速度的影響幾乎都是先上升到一個(gè)頂峰，然后再下降，即在較低濃度時(shí)愈傷組織生長(zhǎng)緩慢，而在較高濃度則又抑制愈傷組織的生長(zhǎng)。 2.在以上基礎(chǔ)之上，研究了海藻糖、蔗糖和乳糖對(duì)愈傷組織內(nèi)可溶性糖含量的影響。結(jié)果表明：用3種糖培

3、養(yǎng)的愈傷組織內(nèi)的可溶性糖含量都隨培養(yǎng)基中糖濃度的增加而增加，培養(yǎng)在3種糖的培養(yǎng)基上的愈傷組織都有一個(gè)體內(nèi)、體外糖趨于平衡的濃度，分別為6％、3％、0.5％，在蔗糖和乳糖培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的愈傷組織體內(nèi)外糖趨于平衡的濃度與愈傷組織生長(zhǎng)的最適濃度剛好一致，而在海藻糖培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的愈傷組織的這兩種濃度并不一致。 3.研究了當(dāng)海藻糖、蔗糖、乳糖在愈傷組織生長(zhǎng)速度達(dá)最大時(shí)，對(duì)愈傷組織中三種同工酶EST、SOD、AMY的影響。結(jié)果如下：除在乳糖培

4、養(yǎng)基上的愈傷組織中EST同工酶無(wú)明顯差別外，在蔗糖和海藻糖培養(yǎng)基上都有較大變化，在糖濃度較高時(shí)都有新酶帶的出現(xiàn)，說(shuō)明可能有新的基因表達(dá)，并在濃度分別為5％和9％時(shí)酶帶都較深，但在濃度都為3％時(shí)酶帶都較淺，這與前面的愈傷組織增殖最適濃度和體內(nèi)、外糖達(dá)平衡的濃度都相一致；在3種糖培養(yǎng)基上的愈傷組織的SOD酶譜中，在高濃度時(shí)，都會(huì)有新酶帶的出現(xiàn)，而在3個(gè)對(duì)照中，隨著時(shí)間的增加，SOD酶帶逐漸減少：3種糖濃度較高時(shí)，淀粉酶的酶帶都較深，可溶性糖