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文檔簡介
1、酸漿屬植物酸漿和小酸漿具有重要的藥用價值,特別是酸漿不僅具有藥用價值,而且具有重要的食用和觀賞價值,擁有廣闊的開發(fā)利用前景。本研究以河南省寶天曼國家級自然保護區(qū)的野生酸漿和小酸漿為實驗材料,研究了不同的外植體類型、不同的激素類型及濃度配比對植物細胞脫分化和再分化的影響,探討了組織培養(yǎng)過程中防止污染及褐化的技術措施,初步建立了酸漿和小酸漿的組織培養(yǎng)體系。 實驗結果表明: (1)酸漿葉片用0.1%的升汞消毒7min效果最好,
2、存活率可高達90.8%;葉柄和莖段對消毒劑較敏感,消毒時間要適當?shù)目s短,最佳的升汞消毒時間都是5 min;子葉、胚軸由于接觸外界的時間較短,3 min即可達理想的消毒效果。 (2)酸漿雖然為多年生草本植物,但其莖木質化較為嚴重,在初代培養(yǎng)中外植體褐化嚴重,不利于組織培養(yǎng)體系的建立。培養(yǎng)基中加入0.5 g/L的PVP,可以在一定程度上抑制外植體褐化。 (3)酸漿誘導不定芽最佳的外植體類型為葉柄,最佳的生長素類型為IAA,最
3、佳的激素濃度組合為MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA,不定芽分化率可達62.5%。 (4)繼代培養(yǎng)中不定芽增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+2.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L IAA,不定芽增殖倍數(shù)可達5.0。 (5)在酸漿試管內生根實驗中,生長素IAA和培養(yǎng)基中低的營養(yǎng)物質濃度都有利于根的形成,但以低的營養(yǎng)物質濃度更有利于根的生成,生根率可達91.7%。 (6)在小酸漿葉片、葉柄、莖段
4、、膨大花萼四種外植體類型中,可以產(chǎn)生兩種類型的愈傷組織,一種為膨大腫脹型,以膨大花萼易于形成此類愈傷組織,一種為疏松脆型,以培養(yǎng)初期的莖段、葉柄及葉片的切口處易于形成此類愈傷組織。兩種類型的愈傷組織中,以疏松脆型的愈傷組織生長較快,不定芽分化率較高。四種外植體中以莖段的愈傷組織誘導率最高,可達100%,且形成時間較早。在莖段細胞脫分化形成愈傷組織的同時,有時伴隨有不定芽直接由莖段外植體產(chǎn)生??傊o段為小酸漿組織培養(yǎng)較為適合的外植體類型
5、。 (7)生長素為小酸漿愈傷組織誘導必需的植物激素,但其濃度變化對愈傷組織誘導率沒有顯著影響。愈傷組織誘導不定芽最佳的激素配比為MS+2.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA或MS+3.0 mg/L 6-BA,誘導率都可達100%。 (8)小酸漿試管苗增殖適合的6-BA濃度范圍為0.05-0.5 mg/L,最高增殖率可達4.28,過高的細胞分裂素濃度抑制試管苗增殖。 (9)低濃度的細胞分裂素有利于小
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