椴樹組織培養(yǎng)研究.pdf

1、該文利用組織培養(yǎng)技術(shù)建立了引進(jìn)的彩葉椴樹金葉椴,皇帝椴和紫椴、蒙椴,糠椴的再生體系.主要從外植體的消毒和選擇、基本培養(yǎng)基的應(yīng)用、外源激素的使用濃度、影響試管苗生根的主要因子以及試管苗的移栽等幾個(gè)方面進(jìn)行了探討,確定了最佳再生途徑.主要結(jié)果如下:1污染控制;椴樹的莖尖對(duì)升汞敏感,出現(xiàn)腋芽壞死現(xiàn)象.以安替福民、青霉素、鏈霉素,84消毒液為消毒劑進(jìn)行了一系列的消毒實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明:84消毒液對(duì)外植體的消毒效果優(yōu)于安替福民.以10％的84消毒液處

2、理種子30min或15%的84消毒液處理種子20min或以15%的84消毒液處理莖尖30min,效果最佳,污染率均為0.用320萬(wàn)單位/L的青霉素+160萬(wàn)單位/L的鏈霉素浸泡35min,或用480萬(wàn)單位/L的青霉素+160萬(wàn)單位/L的鏈霉素浸泡水培苗30min控制細(xì)菌污染,效果最佳.2胚的培養(yǎng);以半成熟的種子為組培材料,不僅利于操作,而且有利于胚的生長(zhǎng).在保定市區(qū),應(yīng)在8月5日左右;白石山山區(qū),則在9月1日左右采集紫椴種子.較適宜的培

3、養(yǎng)基為MS+0.5mg/LKT+0.05mg/LNAA+2.0mg/LGA<,3>.KT的適宜濃度為0.5mg/L,高于或低于這個(gè)濃度都影響胚的生長(zhǎng).3莖尖的啟動(dòng);莖尖的質(zhì)量和取材的時(shí)間是啟動(dòng)成敗的重要因素.應(yīng)采取當(dāng)年生半木質(zhì)化嫩莖或萌蘗為材料,不僅利于啟動(dòng),又利于莖尖的生長(zhǎng)和分化;在取材的時(shí)間上,以4~5月份最佳,6~7月份也較理想.不同的基因型,其啟動(dòng)率不一樣.紫椴、蒙椴>皇帝椴>金葉椴、糠椴.較適宜椴樹啟動(dòng)的培養(yǎng)基為MCM+1.0

4、mg/LBA+0.1mg/LNAA.4增殖培養(yǎng)和褐變控制;椴樹的增殖的基本方式是以通過種胚獲得的無(wú)菌苗和莖尖啟動(dòng)獲得的腋芽進(jìn)行繼代培養(yǎng),以獲得最高的繁殖系數(shù),通過控制培養(yǎng)基中分裂速度濃度來(lái)完成對(duì)讀數(shù)試管苗生長(zhǎng)狀況的調(diào)控.實(shí)驗(yàn)表明:在紫椴、蒙椴增殖培養(yǎng)中,BA對(duì)莖尖的生長(zhǎng)和分化表現(xiàn)穩(wěn)定,其中以WPM+0.05mg/LBA+2.0mg/LGA<,3>+0.05mg/LNAA培養(yǎng)基中莖尖的增殖系數(shù)較高,苗生長(zhǎng)旺盛,莖粗葉大,且成本較低.ZT對(duì)

5、椴樹莖尖的生長(zhǎng)和分化與BA沒有明顯的差異,且成本較高.在金葉椴增殖培養(yǎng)中,TDZ表現(xiàn)出很強(qiáng)的促進(jìn)分化和增殖生長(zhǎng)能力.其中以WPM+0.05mg/LZT+2.0mg/LGA<,3>+0.5mg/LNAA培養(yǎng)基中莖尖的增殖系數(shù)最高.引起褐變現(xiàn)象的因子是多方面的,試驗(yàn)過程中,在培養(yǎng)基中加入0.1 mg/L活性炭+0.1PVP或1.0g/L硫代硫酸鈉+0.1g/L活性炭有效地抑制椴樹褐變的發(fā)生.5生根培養(yǎng)和移栽;影響試管苗的生根因素很多,比較各