乳腺癌癌周浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移過(guò)程中VEGF、Flt-4及p53表達(dá)及意義.pdf

1、背景與目的：近幾年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)有多種生長(zhǎng)因子及其受體在乳腺癌中表達(dá)，分別由腫瘤細(xì)胞、浸潤(rùn)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞及細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生，對(duì)乳腺癌血管生成、轉(zhuǎn)移、預(yù)后有重要作用。乳腺癌的侵襲性生長(zhǎng)及其轉(zhuǎn)移主要依賴于血管和淋巴管的生成，血管和淋巴管不僅提供了腫瘤生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)，而且也是癌細(xì)胞播散的途徑。目前認(rèn)為腫瘤組織中血管形成的發(fā)生主要是由于腫瘤組織細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞等產(chǎn)生的血管生成因子與抑制因子的失衡，導(dǎo)致了血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂增生和微血管生成，

2、同時(shí)微血管的通透性增加。而這其中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascularendothelial growth factor，VEGF)是目前所知作用最強(qiáng)的促血管內(nèi)皮生長(zhǎng)的細(xì)胞因子，是對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的特異性生長(zhǎng)因子，對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的促有絲分裂作用十分強(qiáng)烈，也是目前發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的增加血管通透性的物質(zhì)之一，其刺激血漿蛋白如纖維蛋白的滲出，并在細(xì)胞外基質(zhì)沉積，成為腫瘤基質(zhì)和新生的毛細(xì)血管網(wǎng)絡(luò)基礎(chǔ)，從而促進(jìn)了腫瘤組織中血管的大量生成。而VEGF家族中的V

3、EGF-C及其特異性受體Flt-4是特異性的淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子，可通過(guò)促進(jìn)腫瘤新生淋巴管形成和/或淋巴管的擴(kuò)張，直接或間接促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移。因?yàn)槟[瘤血管和淋巴管形成可能是多基因、多因素共同參與的結(jié)果，所以p53基因的突變或失活可能影響VEGF、Flt-4在乳腺癌中的表達(dá)，對(duì)乳腺癌的發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移發(fā)揮一定的作用。隨著世界范圍內(nèi)對(duì)乳腺癌的手術(shù)治療呈縮小趨勢(shì)，“保留乳房的乳腺癌切除術(shù)”在越來(lái)越多的早期乳腺癌患者中廣泛應(yīng)用。如何選擇合適的手術(shù)

4、切除范圍并指導(dǎo)術(shù)后的輔助治療方式顯得格外重要。乳腺癌保乳手術(shù)局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是目前乳腺外科探討的重點(diǎn)之一。乳腺癌的局部浸潤(rùn)發(fā)生最早并影響淋巴和血行轉(zhuǎn)移，繼而關(guān)系到局部治療方式的選擇和局部控制效果。保乳手術(shù)時(shí)不同病理分型及分期的病人切除范圍尚無(wú)定論，手術(shù)的切除范圍影響復(fù)發(fā)率，尋找與局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)的危險(xiǎn)因子更顯得尤為重要。但直至目前，乳腺癌腫瘤邊緣至切緣的距離，至今尚無(wú)一致意見(jiàn)。本實(shí)驗(yàn)主要通過(guò)觀測(cè)乳腺癌癌周浸潤(rùn)距離的大小，繼而把V

5、EGF、Flt-4及p53在乳腺癌及癌周組織中的表達(dá)的情況進(jìn)行分析，探討其與乳腺癌的組織學(xué)類(lèi)型及分期、腫瘤大小、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、雌孕激素受體等的關(guān)系，闡明vEGF、Flt-4及p53與乳腺癌癌周浸潤(rùn)深度的關(guān)系，從而篩選出浸潤(rùn)深度相關(guān)因子，指導(dǎo)手術(shù)切除范圍以及預(yù)測(cè)腫瘤局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。方法：選取44例乳腺癌標(biāo)本，經(jīng)處理后沿標(biāo)本周邊平均四個(gè)方向分別完整切取一塊腫瘤連同其周邊正常乳腺及結(jié)締組織進(jìn)行常規(guī)H&E染色切片。光鏡下觀察癌周邊四個(gè)方向

6、不同范圍內(nèi)的乳腺和結(jié)締組織內(nèi)有無(wú)癌浸潤(rùn)，計(jì)算距離癌邊緣的距離為浸潤(rùn)深度，以癌浸潤(rùn)最遠(yuǎn)距離計(jì)算。然后選取癌周浸潤(rùn)最遠(yuǎn)距離的切片所對(duì)應(yīng)的石蠟切片作免疫組織化學(xué)染色，以檢測(cè)VEGF、Flt-4及p53在乳腺癌及癌周組織中的表達(dá)情況，同時(shí)觀察10個(gè)400倍視野下Flt-4陽(yáng)性淋巴管個(gè)數(shù)。評(píng)估VEGF、Flt-4及p53的表達(dá)與乳腺癌癌周浸潤(rùn)程度和轉(zhuǎn)移等的關(guān)系。采用單因素方差分析與等級(jí)資料秩和檢驗(yàn)，應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件，P值取<0.05有

7、顯著性差異。 結(jié)果： (1) 44例乳腺癌浸潤(rùn)距離最遠(yuǎn)為13mm。浸潤(rùn)癌巢直徑30～400Hm，中位11Oμm。浸潤(rùn)距離與腫塊大小無(wú)顯著關(guān)系，但與組織學(xué)類(lèi)型有顯著關(guān)系。(2) VEGF與Flt-4的表達(dá)強(qiáng)度在早期浸潤(rùn)癌、浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌與乳頭狀癌間差異均有非常顯著性，其在分化程度低的腫瘤中表達(dá)強(qiáng)度明顯高于分化程度高的腫瘤。Flt-4與腫瘤分期、ER、PR受體表達(dá)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有明顯關(guān)系，但是VEGF與上述指標(biāo)關(guān)系不大。(3)VEGF

8、與Flt-4在腫瘤實(shí)體的表達(dá)越強(qiáng)，其腫瘤的浸潤(rùn)能力越強(qiáng)，其生長(zhǎng)浸潤(rùn)的距離越遠(yuǎn)，p53表達(dá)則與癌周浸潤(rùn)無(wú)明顯關(guān)聯(lián)。Flt-4陽(yáng)性淋巴管數(shù)在浸潤(rùn)距離遠(yuǎn)的腫瘤中高于浸潤(rùn)距離近的腫瘤。其在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性組中的表達(dá)水平明顯高于淋巴結(jié)表達(dá)陰性組。 (4) 癌組織VEGF、Flt-4及p53的表達(dá)強(qiáng)度均明顯高于癌周正常乳腺組織，距離癌腫區(qū)越遠(yuǎn)，以上各因子的表達(dá)強(qiáng)度越低。VEGF、Flt-4及p53在近癌區(qū)與中距離區(qū)、遠(yuǎn)癌區(qū)、癌周正常組織表達(dá)差異均有顯

9、著性。中距離區(qū)與遠(yuǎn)癌區(qū)、癌周正常組織比較差異有顯著性，遠(yuǎn)癌區(qū)與癌周正常組織比較差異無(wú)顯著性。 (5) p53表達(dá)的強(qiáng)度與VEGF、Flt-4表達(dá)的強(qiáng)度均有顯著關(guān)聯(lián)，而VEGF表達(dá)的強(qiáng)度與Flt-4表達(dá)的強(qiáng)度也存在顯著關(guān)聯(lián)。結(jié)論： (1)VEGF與Flt-4在乳腺癌中表達(dá)水平與乳腺癌的惡性程度和浸潤(rùn)能力相關(guān)，二者的高表達(dá)促進(jìn)癌周的局部浸潤(rùn)；Flt-4及其陽(yáng)性淋巴管的高表達(dá)還可能與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。(2)P53基因的突變或失活促使了V

10、EGF的表達(dá)，腫瘤新生血管生成；P53基因的突變或失活是乳腺癌發(fā)生與發(fā)展的早期事件并且貫穿乳腺癌發(fā)展的整個(gè)過(guò)程，對(duì)腫瘤發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移發(fā)揮一定的作用。 (3)距離乳腺癌邊緣>1.3cm是保乳手術(shù)時(shí)的“相對(duì)安全距離”，保乳手術(shù)時(shí)需切除腫瘤邊緣至少1.5cm正常組織，可有效降低癌殘留率，同時(shí)可能降低腫瘤局部復(fù)發(fā)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的機(jī)會(huì)。但無(wú)需將切除范圍擴(kuò)大到>3cm，需結(jié)合個(gè)體差異和臨床指標(biāo)進(jìn)行選擇。(4)VEGF與Flt-4可為臨床上早期預(yù)測(cè)乳腺癌