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1、目的:應(yīng)用多重聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)方法在同一體系中對布氏菌6個種進行鑒定。建立一種能夠快速鑒定布氏菌的分子生物學(xué)方法。提高布氏菌鑒定快速性、準(zhǔn)確性和安全性。 方法:分析布氏菌6個菌種之間的基因差異,根據(jù)每個菌種特異缺失的基因片段設(shè)計5對引物,用混合體系PCR對布氏菌進行鑒定。先用標(biāo)準(zhǔn)菌株建立方法,優(yōu)化實驗條件,然后擴增地方株進行驗證。 結(jié)果:多重引物PCR方法能將除綿羊附睪種外其余5個布氏菌種全部鑒定出來。經(jīng)過對地方株
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