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1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?
研究工頻磁場(chǎng)暴露對(duì)FL細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)酰胺代謝的影響。
實(shí)驗(yàn)方法:
人羊膜(FL)細(xì)胞經(jīng)50Hz,0.4mT工頻磁場(chǎng)分別暴露5min,15min,30min和1hour后,用改良的Folch法進(jìn)行脂類(lèi)提取,采用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法PIS模式下分析FL細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)酰胺的種類(lèi),在MRM模式下分析不同神經(jīng)酰胺含量變化;隨后分別用伏馬菌素(FB1)和丙咪嗪(Imipramine)預(yù)處理抑制神經(jīng)酰胺從頭合成途徑
2、和酸性鞘磷脂酶水解途徑,用N-acetylcysteine(NAC)預(yù)處理抑制活性氧(ROS)后,以工頻磁場(chǎng)暴露15min,并采用同樣的方法提取并檢測(cè)FL細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)酰胺含量的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
經(jīng)工頻磁場(chǎng)輻照5min,15min,30min和1hour后,細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)酰胺含量明顯升高,且C16CER均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(1hour組P<0.01,其余組P<0.05),C18CE
3、R在5min差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);C24CER在15min(P<0.01)和1hour(P<0.05)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。伏馬菌素(FB1)預(yù)處理可抑制工頻磁場(chǎng)暴露對(duì)神經(jīng)酰胺含量的誘導(dǎo)作用,然而沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;而丙咪嗪(Imipramine)預(yù)處理則能顯著抑制工頻磁場(chǎng)對(duì)C24CER的誘導(dǎo)作用(P<0.05),C18CER含量雖有有一定程度降低,但未見(jiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。NAC預(yù)處理同樣可以顯著抑制工頻磁場(chǎng)對(duì)C24CER神經(jīng)酰胺的誘導(dǎo)
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