香豬源性降膽固醇雙歧桿菌的培養(yǎng)優(yōu)化及其微囊化制備.pdf

1、隨著人們生活水平的日益提高，心腦血管疾病發(fā)病率也越來(lái)越高，其主要原因就是攝入高膽固醇飲食導(dǎo)致了血清膽固醇含量增高。國(guó)內(nèi)外大量研究表明雙歧桿菌是一種具有良好降膽固醇能力的益生菌，本課題以貴州特色資源香豬腸道內(nèi)溶物及糞便作為篩選源，篩選出一株降膽固醇能力高且耐酸受性、耐膽鹽受性好的雙歧桿菌，并對(duì)其培養(yǎng)基成份進(jìn)行優(yōu)化，得到最佳培養(yǎng)基組成成份，然后以海藻酸鈉為壁材將雙歧桿菌進(jìn)行包埋，制備出雙歧桿菌微膠囊。得到如下主要結(jié)論：
　?。?）本實(shí)

2、驗(yàn)以貴州特色資源香豬為篩選源，采用含有莫匹羅星鋰鹽的MRS培養(yǎng)基及涂布有X-gal的PTYG瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行初篩，結(jié)合雙歧桿菌所特有的菌落形態(tài)及菌體形態(tài)，通過(guò)初篩實(shí)驗(yàn)，一共篩選得到70株雙歧桿菌疑似菌株。
　?。?）以膽固醇去除率為指標(biāo)，采用鄰苯二甲醛（OPA）法對(duì)初篩時(shí)得到的70株菌進(jìn)行降膽固醇實(shí)驗(yàn)，并通過(guò)模擬人體的胃腸道環(huán)境，將降膽固醇能力高的菌株進(jìn)行耐酸耐膽鹽受性實(shí)驗(yàn)。最終得到一株降膽固醇能力高且耐酸耐膽鹽受性好的菌株BZ11

3、，其膽固醇去除率達(dá)到了38.52％，對(duì)該菌株進(jìn)行形態(tài)學(xué)、16S rRNA序列分析，鑒定為動(dòng)物雙歧桿菌乳亞種。
　?。?）對(duì)動(dòng)物雙歧桿菌乳亞種BZ11（CGMCC NO.10224）進(jìn)行培養(yǎng)基成份優(yōu)化，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用PB試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)7個(gè)培養(yǎng)基成份進(jìn)行考察，篩選得到了3個(gè)關(guān)鍵因素，然后利用快速登高試驗(yàn)以及Box-Behnken響應(yīng)面設(shè)計(jì)試驗(yàn)確定關(guān)鍵因素的最佳濃度，以提高雙歧桿菌菌體生長(zhǎng)量。優(yōu)化后得到的最佳培養(yǎng)基成分為：麥芽糖

4、1.08%、葡萄糖0.89%、胰蛋白胨0.51%、大豆蛋白胨0.89%、酵母粉0.89%、胡蘿卜汁14.33%和卷心菜汁17.78%。雙歧桿菌菌體生長(zhǎng)量OD600值達(dá)到最大為1.714，其活菌數(shù)達(dá)到了1011數(shù)量級(jí)，與優(yōu)化前相比，其活菌數(shù)提高了一個(gè)數(shù)量級(jí)，且其降膽固醇能力提高了8.26%。
　?。?）以海藻酸鈉為壁材，對(duì)自篩菌動(dòng)物雙歧桿菌乳亞種BZ11（CGMCC NO.10224）進(jìn)行包埋，制備出了雙歧桿菌微膠囊，并對(duì)其進(jìn)行人工