2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討雷帕霉素對大鼠肝臟冷缺血再灌注肺損傷的影響及相關機制。
  方法:健康雄性SD大鼠24只,8~10周齡,體重220~250 g,采用隨機數(shù)字表法,將其隨機分為3組:假手術組(S組)大鼠僅接受麻醉后開腹,游離肝葉及相關血管后關腹;模型對照組(C組)大鼠采用肝臟冷缺血再灌注模型,分別采用門靜脈插管和肝下下腔靜脈缺口作為灌注道和流出道,于腸系膜上靜脈上方和右腎靜脈上方阻斷門靜脈及肝下下腔靜脈,同時阻斷肝上下腔靜脈,用4℃乳酸林

2、格氏液經(jīng)門靜脈插管灌注肝臟,用吸引器及時吸凈肝下下腔靜脈缺口流出的血和灌注液,灌注過程中將包有紗布的冰塊置于肝臟表面維持低溫,20 min后隨即恢復肝臟血液灌注,沖洗腹腔后關腹;雷帕霉素組(R組)大鼠術前2w連續(xù)給予1 mg/kg/d雷帕霉素灌胃,手術操作同C組。于再灌注12 h時抽取下腔靜脈血樣,采用酶聯(lián)免疫吸附分析(ELISA)測定血清中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-6(IL-6)濃度。切取肺,取部分肺制成肺組織勻漿,

3、測定肺組織內(nèi)丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。一部分肺組織分別采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)和蛋白質(zhì)免疫印跡(Western blot)技術檢測誘導型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA及哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信號通路蛋白的表達水平。另取部分肺組織用10%甲醛溶液固定,常規(guī)石蠟包埋,切成4μm薄片,行蘇木素-伊紅(HE)染色后于光學顯微鏡下觀察肺組織病理學結(jié)果。數(shù)據(jù)應用SPSS1

4、7.0統(tǒng)計軟件進行分析處理,計量資料以均數(shù)±標準差表示,組間比較采用單因素方差分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
  結(jié)果:與S組相比,C、R組血清中TNF-α、IL-6的濃度均升高(P<0.05),肺組織勻漿MDA、NO的含量升高及iNOS mRNA的表達上調(diào),mTOR蛋白量表達增多,SOD活性降低(P<0.05);與C組相比,R組血清中TNF-α、IL-6的濃度均降低(P<0.05),肺組織勻漿MDA、NO的含量降低及iN

5、OS mRNA的表達下調(diào),mTOR蛋白量表達減少,SOD活性升高(P<0.05)。光鏡下S組肺組織形態(tài)結(jié)構未見明顯病理學改變,C組可見大量的炎性細胞浸潤,肺泡大小不一,肺泡間隔增寬,大量紅細胞滲出,毛細血管充血;R組損傷較輕,僅見少量炎性細胞浸潤,部分肺泡間隔增寬。
  結(jié)論:1.大鼠肝臟冷缺血再灌注損傷能激活mTOR信號通路,恢復血流灌注后損傷明顯,氧化應激、炎癥反應及mTOR信號通路的激活在肝臟冷缺血再灌注肺損傷的發(fā)生過程中起

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