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文檔簡介
1、在人類生存環(huán)境中,電離輻射時刻威脅著人們的健康,人們一直在尋求有效的防護(hù)藥物,目前廣泛應(yīng)用于臨床且效果滿意的輻射防護(hù)藥物并不多,尋找高效低毒活性高,不良反應(yīng)少的輻射防護(hù)劑變得日益重要。國內(nèi)外對輻射防護(hù)劑的研究都比較重視,除含硫化合物外,細(xì)胞生長因子、天然藥物等以外,對細(xì)胞活素類,中草藥及復(fù)方、雌激素的抗輻射作用研究也較多。
天然化合物香蘭素,研究證實其具有抗氧化和抗誘變活性,清除電離輻射產(chǎn)生的自由基,抑制射線誘導(dǎo)的DNA和染色
2、體損傷等,但其作用濃度高,活性相對較低。本實驗室篩選出輻射防護(hù)作用更好的香蘭素衍生物--丁香醛,已證實,丁香醛清除電離輻射產(chǎn)生的自由基的效果更好,可降低DNA損傷,提高DNA損傷修復(fù)能力以及輻射細(xì)胞存活率。丁香醛合成方便,理化性質(zhì)穩(wěn)定,具有開發(fā)成為新型輻射防護(hù)藥的價值。藥物代謝動力學(xué)發(fā)現(xiàn),丁香醛進(jìn)入動物體內(nèi)10~15min即可被機(jī)體吸收,達(dá)到血液循環(huán)的量明顯低于給藥劑量,在血漿里檢測到大量的丁香酸和少量的丁香醇,推測丁香醛進(jìn)入體內(nèi)發(fā)揮輻
3、射防護(hù)作用的是其主要代謝物--丁香酸或者兩種代謝物(丁香酸和丁香醇的混合物,以下簡稱混合物)協(xié)同發(fā)揮作用。本課題將從藥效學(xué)部分研究,利用細(xì)胞實驗觀察和比較丁香醛主要代謝物--丁香酸和混合物的輻射防護(hù)作用。利用動物實驗對丁香醛的主要代謝物--丁香酸的放射性氧化損傷和放射性造血損傷的防護(hù)作用進(jìn)行研究,為丁香醛的進(jìn)一步臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:
1.MTT方法觀察丁香醛代謝物對輻射后MEFs細(xì)胞效應(yīng),結(jié)果顯示:和0μm
4、ol/L組相比,各加藥組的OD值明顯增加(p<0.01),說明丁香醛代謝物能有效減輕輻射對MEF細(xì)胞的損傷。
2.MTT方法觀察丁香醛代謝物對照射后的MEFs細(xì)胞活力,結(jié)果顯示:和IR組相比,各加藥組的OD值明顯增加(p<0.01),說明丁香醛代謝物能夠提高輻射后的MEF細(xì)胞活力。
3.細(xì)胞增殖實驗觀察丁香醛代謝物對照射后的MEFs細(xì)胞生長的影響,通過繪制細(xì)胞生長曲線顯示,和IR組相比,丁香醛代謝物能促進(jìn)照射后MEF
5、s細(xì)胞增殖。
4.細(xì)胞克隆形成實驗檢測丁香醛代謝物對照射后的MEFs細(xì)胞克隆形成率的影響,結(jié)果顯示:和IR組相比,各加藥組都能夠提高細(xì)胞克隆形成率,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01),說丁香醛代謝物能提高照后MEFs細(xì)胞克隆形成率。
5.小鼠骨髓有核細(xì)胞計數(shù),觀察丁香酸對小鼠骨髓造血損傷的作用,與IR組相比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01),說明丁香酸對照后小鼠骨髓有核細(xì)胞有一定的輻射保護(hù)作用,能夠有效減輕小鼠骨髓造
6、血損傷。
6.流式細(xì)胞術(shù)檢測小鼠骨髓有核細(xì)胞凋亡,結(jié)果顯示,與IR組相比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01),說明丁香酸可降低輻射誘導(dǎo)的小鼠骨髓有核細(xì)胞凋亡。
7.照后取小鼠骨髓和脾臟組織,處理后光鏡下觀察各組動物的骨髓和脾臟的組織病理學(xué)變化,結(jié)果顯示:和IR組相比,丁香酸組小鼠的骨髓和脾臟組織損傷明顯減輕。
8.利用試劑盒檢測丁香酸對照后小鼠抗氧化損傷作用,與IR組相比較,丁香酸組在照后3d和6d,SOD
7、活性的恢復(fù)都較顯著,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01),說明丁香酸可促進(jìn)小鼠血清SOD活性的恢復(fù),同時也降低了血清MDA的含量,與IR組比較有顯著的差異(p<0.01),丁香酸能夠增強(qiáng)細(xì)胞清除自由基的能力,減輕輻射誘發(fā)的膜脂質(zhì)過氧化損傷程度,減輕細(xì)胞的輻射損傷。
綜上所述,丁香醛代謝物對MEFs細(xì)胞具有輻射損傷防護(hù)作用,丁香醛主要代謝物--丁香酸對輻射小鼠也具有抗氧化損傷和造血損傷防護(hù)作用,為丁香醛的進(jìn)一步應(yīng)用于臨床提供實驗依據(jù)
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