天南星科有毒中藥刺激性毒性成分及礬制解毒共性機(jī)制研究.pdf

1、本課題來(lái)源于“十一五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目：“復(fù)制法礬制解毒共性技術(shù)和相關(guān)設(shè)備研究”（編號(hào)：2006BAI09806-10）；國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目：半夏刺激性毒性的物質(zhì)基礎(chǔ)和炮制解毒機(jī)理研究“（編號(hào)：30772785）。 2005年版中國(guó)藥典收載的半夏、天南星和禹白附均屬于天南星科有毒中藥，另外，天南星科的有毒中藥虎掌南星在市場(chǎng)工作為天南星代用品廣泛使用。天南星科的這些中藥生品具有強(qiáng)烈的刺激性毒性，主要表現(xiàn)為對(duì)黏膜的刺激性，可致

2、口唇腫痛、失音、流涎、痙攣、呼吸困難，甚至窒息死亡。因此，中醫(yī)臨床上均使用其炮制品，在炮制工藝中共同的炮制解毒輔料是白礬。根據(jù)天南星科有毒中藥均采用白礬進(jìn)行炮制解毒的現(xiàn)象，本課題提出，天南星科的有毒中藥可能含有類似的毒性成分；白礬炮制解毒的機(jī)理可能存在共性的規(guī)律的假說(shuō)。本文在本課題組前期對(duì)半夏的刺激性毒性成分和炮制減毒機(jī)理研究的基礎(chǔ)上，針對(duì)天南星科四種有毒中藥半夏、虎掌南星、東北天南星和禹白附是否具有共性刺激性毒性成分及礬制解毒作用是否

3、具有共性機(jī)制進(jìn)行系統(tǒng)深入的研究。 在天南星科四種有毒中藥刺激性毒性成分及礬制解毒機(jī)制研究工作中，主要工作內(nèi)容和研究結(jié)果包括以下幾方面： 1.天南星科四種有毒中藥具有共性的刺激性毒性成分研究。 對(duì)天南星科有毒中藥半夏、虎掌南星、東北天南星、禹白附的刺激性毒性成分，采用不同極性的溶劑進(jìn)行提取分離，分別得到四種有毒中藥不同極性溶劑提取物；同時(shí)采用低速逐級(jí)離心技術(shù)從四種有毒中藥中分離出針晶，以草酸鈣化學(xué)品為對(duì)照，以家兔眼

4、結(jié)膜刺激性模型進(jìn)行篩選，研究表明四種有毒中藥中具有特殊晶型的針晶為共性的刺激性毒性成分，命名為“毒針晶”。 2.天南星科四種有毒中藥刺激性毒性的強(qiáng)度比較及毒針晶量-毒關(guān)系研究。 在明確天南星科四種有毒中藥刺激性毒性成分的基礎(chǔ)上，以小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)比較生品和毒針晶毒性的強(qiáng)弱，以四種有毒中藥生品粉末進(jìn)行家兔眼結(jié)膜刺激性毒性實(shí)驗(yàn)，研究表明，四種有毒中藥毒性的強(qiáng)弱順序?yàn)椋夯⒄颇闲?半夏>東北天南星>禹白附；小鼠腹腔注射四種有毒中

5、藥的粉末和毒針晶考察毒針晶對(duì)腸系膜粘膜的刺激性作用方式，研究發(fā)現(xiàn)毒針晶可直接刺入小鼠腸系膜組織細(xì)胞內(nèi)部。進(jìn)一步對(duì)四種有毒中藥毒針晶刺激性毒性強(qiáng)度和濃度的量-毒關(guān)系進(jìn)行研究，結(jié)果表明各有毒中藥所提取的毒針晶其刺激性毒性均隨濃度的增加而增強(qiáng)，在一定的濃度范圍內(nèi)，呈現(xiàn)出線性的量-毒關(guān)系，進(jìn)一步證實(shí)毒針晶為該四種有毒中藥的共性毒性成分。 3.天南星科四種有毒中藥毒針晶的研究。 天南星科四種有毒中藥生品中毒針晶的含量測(cè)定結(jié)果表明，

6、各中藥中毒針晶含量高低依次為：虎掌南星>半夏>東北天南星>禹白附，該結(jié)果與四種有毒中藥刺激性毒性強(qiáng)度順序一致，進(jìn)一步證實(shí)毒針晶是天南星科有毒中藥共性的刺激性毒性成分。對(duì)四種有毒中藥的毒針晶采用光學(xué)顯微、電鏡掃描、X-衍射、光電能譜、紅外光譜、組成鑒定及含量分析、凝膠電泳實(shí)驗(yàn)進(jìn)行研究。研究結(jié)果表明，四種毒針晶的結(jié)構(gòu)晶型和組成成分具有共同的特點(diǎn)。在晶型上，掃描電鏡觀察毒針晶的細(xì)微結(jié)構(gòu)顯示，四種中藥的毒針晶：均具有針尖樣的末端，尖銳鋒利，晶體

7、表面具凹槽、布滿倒刺的特殊結(jié)構(gòu)；采用X-衍射、光電能譜、紅外光譜對(duì)四種毒針晶進(jìn)行組成分析，結(jié)果表明針晶中主要含有草酸鈣以及-NH2和-COOH、-S-基團(tuán)；定性鑒別和組成分析結(jié)果表明四種毒針晶均由草酸鈣和蛋白及微量的糖類成分組成：以SDS-凝膠電泳分離四種毒針晶蛋白結(jié)果表明，四種毒針晶中的主要蛋白條帶基本一致，均含有分子量約26KD和51KD的蛋白；四種有毒中藥毒針晶中分離獲得的針晶蛋白均具有強(qiáng)烈的刺激性和致敏性。測(cè)定四種毒針晶中蛋白的

8、含量結(jié)果表明；毒針晶蛋白的含量順序?yàn)椋夯⒄颇闲?半夏>東北天南星>禹白附，該順序也與四種中藥的毒性強(qiáng)度順序一致，說(shuō)明毒針晶毒性的產(chǎn)生不僅與針晶的晶型有關(guān)，也與針晶的蛋白有關(guān)。 4.天南星科四種有毒中藥礬制解毒共性機(jī)制研究。 在確定四種有毒中藥刺激性毒性成分的基礎(chǔ)上，以毒性成分的含量變化為指標(biāo)，以針晶中的成分與礬水體系中離子的相互作用和反應(yīng)過(guò)程進(jìn)行理論分析和實(shí)驗(yàn)，對(duì)天南星科有毒中藥礬制解毒共性機(jī)理進(jìn)行了研究。研究表明天南星

9、科有毒中藥礬制解毒機(jī)理主要是：白礬溶液中的Al3+能夠結(jié)合毒針晶中的C2O42-，使得毒針晶草酸鈣分解破壞，同時(shí)白礬溶液呈酸性，在酸性水溶液中毒針晶蛋白溶解或水解，從而徹底破壞了毒針晶的結(jié)構(gòu)和晶型和成分組成，導(dǎo)致刺激性毒性下降或解除。 研究結(jié)果表明：天南星科四種常用的有毒中藥的刺激性毒性成分同屬一類，同為由草酸鈣、蛋白為主要成分復(fù)合而成具有特殊晶型結(jié)構(gòu)的毒蛋白草酸鈣針晶，毒性的產(chǎn)生主要由于毒針晶特殊晶型的機(jī)械刺激和針晶蛋白的致敏

10、化學(xué)刺激共同作用導(dǎo)致。四種有毒中藥的毒性的大小與毒針晶含量高低和毒針晶中蛋白含量高低呈現(xiàn)出一致的規(guī)律，以半夏屬的虎掌南星為最強(qiáng)，依次為半夏、東北天南星、禹白附。 以白礬溶液炮制四種有毒中藥共性的解毒機(jī)制是由于礬水體系中的Al3+與毒針晶中草酸鈣分子中的草酸根離子結(jié)合促使草酸鈣分解；針晶的剛性支撐被破壞，同時(shí)酸性的礬水體系又使得毒針晶中蛋白溶解或水解，整個(gè)晶體被破壞，毒性消失。 綜上所述，天南星科有毒中藥半夏、虎掌南星、東