構建小鼠慢性炎癥-黑色素瘤復合模型的研究.pdf

1、目的：
　　探索建立小鼠慢性炎癥-黑色素瘤復合模型的方法，通過觀察慢性炎癥對腫瘤體積、重量、微血管密度的影響，闡明慢性炎癥對進展期移植腫瘤生長的影響，為進一步研究炎癥因子對腫瘤生長的影響打下實驗學基礎。
　　內容：
　　1.慢性炎癥模型的建立：在小鼠背部皮下注入空氣制作氣囊，向氣囊里注入致炎物質脂多糖、卡介苗，觀察慢性炎癥模型造模效果以及炎癥由急性進入慢性的時間段。
　　2.黑色素瘤模型的建立：75％酒精棉球消毒

2、小鼠后，在鼠蹊部皮下注入黑色素瘤細胞懸浮液。
　　3.慢性炎癥-黑色素瘤復合模型的建立：在小鼠背部皮下注入空氣制作氣囊或包埋玻璃珠后，每周向氣囊里或玻璃珠周圍注入致炎物質。初次注入致炎物質3天后，在鼠蹊部皮下注入黑色素瘤細胞懸浮液建立四種小鼠慢性炎癥-黑色素瘤復合模型，比較優(yōu)劣，選擇合適的慢性炎癥-黑色素瘤復合模型。
　　4.慢性炎癥對黑色素瘤體積、重量和遠處轉移的影響：建立慢性炎癥-黑色素瘤復合模型，比較對照組與實驗組腫瘤

3、體積、重量的變化和肺、肝、脾的轉移發(fā)生率。
　　5.慢性炎癥對微血管密度的影響：通過HE染色比較對照組與實驗組微血管密度，明確內皮依賴性血管在炎癥環(huán)境中的變化。
　　方法：
　　1.在小鼠背部皮下注入空氣制作氣囊，向氣囊里注入致炎物質脂多糖、卡介苗，建立兩種慢性炎癥模型，觀察造模效果以及模型達到慢性炎癥狀態(tài)的時間段。
　　2.在前期實驗基礎上，在小鼠上分別建立氣囊卡介苗致炎腫瘤模型(A組)，氣囊弗氏佐劑致炎腫瘤模

4、型(B組)，氣囊脂多糖致炎腫瘤模型(C組)，埋珠脂多糖致炎腫瘤模型(D組)，生理鹽水腫瘤模型為對照組(E組)。
　　3.計算各組腫瘤不同觀測時間點的體積，重量并進行比較。HE染色，高倍光鏡下辨認微血管，按Weidner法計數腫瘤組織樣本中微血管數；觀察腫瘤臟器轉移的發(fā)生率。
　　結果：
　　1.在小鼠背部皮下制作氣囊，注入脂多糖或卡介苗可以成功地建立小鼠皮下氣囊慢性炎癥模型。此模型能較好地模擬在單一致炎因子存在情況下引

5、起的慢性炎癥狀態(tài)。以脂多糖或卡介苗作為致炎物質的氣囊炎癥模型達到慢性炎癥狀態(tài)的時間為造模后1周左右。
　　2.不同慢性炎癥-黑色素瘤復合模型的效果：在所有小鼠的肺、肝、脾中均未發(fā)現黑色素瘤轉移灶；A組腫瘤重量在建模后第21d差異有統(tǒng)計學意義，B組腫瘤重量在建模后第15d、21d差異有統(tǒng)計學意義，體積在第21d有統(tǒng)計學差異。C組腫瘤和D組腫瘤和體積重量在建模后第9d、21d差異有統(tǒng)計學意義。
　　3.不同慢性炎癥-黑色素瘤復合

6、模型中MVD的表現：A組腫瘤MVD在建模后第9d、15d、21d、27d差異有統(tǒng)計學意義。B組腫瘤MVD在建模后第9d、15d、21d、27d差異有統(tǒng)計學意義。C組腫瘤MVD在建模后第21d差異有統(tǒng)計學意義。D組腫瘤建模后第15d、21d差異有統(tǒng)計學意義。
　　結論：
　　1.建立了小鼠皮下氣囊慢性炎癥模型，此模型能較好地模擬在單一致炎因子存在情況下引起的慢性炎癥狀態(tài)。
　　2.建立四種對腫瘤生長有影響的動物模型，在致