釀酒酵母PKA催化亞基的活性比較研究.pdf

1、釀酒酵母的Ras-cAMP信號(hào)通路在調(diào)控酵母細(xì)胞代謝、增殖、分化、壓力抗性以及菌絲生長(zhǎng)過(guò)程中具有重要的作用。蛋白激酶A（PKA）是Ras-cAMP信號(hào)通路的主要靶標(biāo)。PKA催化亞基由基因TPK1、TPK2和TPK3編碼，二聚體調(diào)節(jié)亞基由BCY1基因編碼。cAMP和PKA的調(diào)節(jié)亞基結(jié)合，釋放出其催化亞基而激活了PKA。PKA通過(guò)負(fù)調(diào)控鋅指蛋白轉(zhuǎn)錄因子Msn2/4和蛋白激酶Rim15來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞對(duì)壓力的響應(yīng)。PKA活性高的細(xì)胞對(duì)熱敏感，而PK

2、A活性低的細(xì)胞對(duì)熱有抗性。Yak1處于PKA的下游，受PKA的負(fù)調(diào)控作用，對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)有抑制作用。缺失YAK1基因能提高PKA活性。三個(gè)TPK基因有靶標(biāo)特異性，但它們?cè)赑KA活性方面有什么差異還不清楚。 本文構(gòu)建了缺失一個(gè)TPK基因或缺失兩個(gè)TPK基因的菌株，對(duì)它們的熱擊抗性進(jìn)行比較研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，不同TPK基因表達(dá)產(chǎn)物的協(xié)同作用產(chǎn)生的PKA活性不同。在YAK1基因缺失背景下，TPK2基因表達(dá)產(chǎn)物的PKA活性最高，TPK3基