生后母嬰分離增強(qiáng)大鼠L5皮層錐體神經(jīng)元Tonic GABA電流和促進(jìn)大腦GABA能神經(jīng)元的發(fā)生.pdf

1、越來(lái)越多的證據(jù)支持負(fù)面的早期生活事件的暴露可導(dǎo)致神經(jīng)發(fā)育方面永久性的改變，提高成年后一些精神疾病的易感性。物理或情感忽視，即操縱母嬰間的相互作用，在低反應(yīng)周期（第2至14日齡之間）分離母親和幼崽，已作為負(fù)面的早期生活事件被廣泛地應(yīng)用于制作動(dòng)物模型。這種模式是非常適合用來(lái)研究某些精神疾病的起源及其相關(guān)機(jī)制。目前多數(shù)神經(jīng)精神疾病存在早期發(fā)展根源。已發(fā)現(xiàn)生后母嬰分離(PMS)可引起類(lèi)似抑郁反應(yīng)和易沖動(dòng)等異常行為及成年期動(dòng)物的認(rèn)知障礙。

2、　　以往的研究業(yè)已表明PMS后一些神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)（包括谷氨酸、多巴胺和5-羥色胺）的活性發(fā)生了改變。最近報(bào)道，PMS導(dǎo)致海馬和額葉皮層的神經(jīng)元密度顯著減少，同時(shí)伴隨未成年期大鼠突觸可塑性的多種標(biāo)記物下降。然而，無(wú)論是新分化的神經(jīng)元的數(shù)量，還是PMS后新生細(xì)胞GABA能的命運(yùn)都未在未成年期動(dòng)物中進(jìn)行研究。因?yàn)檫@些新出生的細(xì)胞在大腦中的整合能影響神經(jīng)回路的功能。
　　本課題主要研究PMS對(duì)大鼠以下3方面的影響:1）探索性活動(dòng)和焦慮相關(guān)的

3、行為;2）細(xì)胞增殖、分化，新生細(xì)胞的生存狀況;3）未成年期動(dòng)物L(fēng)5皮層錐體神經(jīng)元的Tonic GABA電流變化，旨在探討一些精神疾病的發(fā)育起源及其相關(guān)機(jī)制。
　　方法:
　　P2～P15制備PMS動(dòng)物模型，設(shè)對(duì)照組;MS1h組（子鼠每天離母1小時(shí)），MS3h組（子鼠每天離母3小時(shí)）。在MS暴露結(jié)束后所有的動(dòng)物獲得了連續(xù)5天腹腔內(nèi)注射50毫克/千克的BrdU。P31-54分別進(jìn)行包括曠場(chǎng)試驗(yàn)、高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)、糖水消耗實(shí)驗(yàn)、強(qiáng)

4、迫游泳實(shí)驗(yàn)。收集不同日齡腦片標(biāo)本，免疫組化染色，激光共聚焦檢測(cè)，對(duì)L1皮層、側(cè)腦室壁的腦室下層(SVZ)和海馬齒狀回(DG)區(qū)Ki-67/BrdU和GAD-67/BrdU陽(yáng)性共標(biāo)記的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。為了檢測(cè)PMS后Tonic GABA電流的變化，我們做了PMS后兩個(gè)年齡段的L5皮層錐體細(xì)胞的全細(xì)胞電壓鉗記錄:未成年(P7-10)和成年(P30-35)。
　　結(jié)果:
　　PMS能夠改變曠場(chǎng)試驗(yàn)和高架十字迷宮測(cè)試中探索性活動(dòng)和焦慮

5、行為。其次，PMS能增加成年大鼠大腦SVZ、L1皮層和海馬DG區(qū)的細(xì)胞增殖。此外，PMS能促進(jìn)新生的細(xì)胞分化為GABA能神經(jīng)元;還能促使PMS后新生并在成年期仍生存的神經(jīng)細(xì)胞，維持GABA能神經(jīng)元比例在較高水平。最后，PMS可以增強(qiáng)P7-10、P30-35的L5皮層錐體細(xì)胞的Tonic GABA電流。
　　結(jié)論:
　　新生GABA能神經(jīng)元和低GABA濃度激活的Tonic GABA電流，主宰新皮質(zhì)錐體細(xì)胞GABA能傳輸，可能在