2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、  本文通過兩步層析分離法對食蚊魚(Gmbusiaaffinis)卵黃脂蛋白(Lv)進(jìn)行分離純化。凝膠層析采用Sephacryls-300柱,在FPLC上進(jìn)行分離洗脫。一共出現(xiàn)五個洗脫峰,對各峰樣品濃縮后進(jìn)行電泳分析,第三峰中蛋白含量最高,經(jīng)鑒定為Lv,收集后離心濃縮上DEAE-cellulose陰離子交換柱,經(jīng)過0.1~1MNaCl梯度洗脫,得到純化的Lv。以純化后的Lv作為抗原,注射免疫制備兔抗Lv抗血清并建立起了間接競爭酶聯(lián)免疫吸

2、附反應(yīng)(ELISA)方法來檢測雄魚體內(nèi)卵黃蛋白原(Vtg)的含量,經(jīng)PAGE電泳以及Westernblotting分析,制備的抗Lv抗血清與純化的Lv有交叉反應(yīng),抗血清具有良好的特異性。該ELISA方法最低檢測濃度為62.5ng/ml,工作范圍為62.5~1000ng/ml。研究結(jié)果顯示,通過對室內(nèi)和野外水體原位暴露的比較,食蚊魚Vtg的間接競爭ELISA檢測法可以作為一種靈敏有效的環(huán)境激素檢測方法,應(yīng)用于野外水環(huán)境污染物的調(diào)查和初步分

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