欖香烯及eIF4E反義寡核苷酸對人食管癌EC-1細(xì)胞中eIF4E、4EBP1表達(dá)影響的研究.pdf

1、授 予 單 位 代 碼 :學(xué) 號 或 申 請 號 :密 級 :10 4 5 9. 2 0 0 6 1. 2 0 2 6 10 0 10 4 0 1Q 一-公 開 _ _文學(xué) 論 大 位 州 學(xué) 鄭 士碩(科 學(xué) 學(xué)位 )欖 香烯 及 e工 F4E 反義寡核昔酸對人食 管癌 EC - 1 細(xì)胞 中eIF4E 、4EBP I 表 達(dá) 影 響 的研 究院 系 名 稱 : 基礎(chǔ) 醫(yī)學(xué) 院學(xué) 科 門 類 : 醫(yī) 學(xué)專 業(yè) 名 稱 : 病理 學(xué)與病

2、 理生理學(xué)作 者 姓 名 : 王志永導(dǎo)師姓 名 、職 稱 : 張 紅 教授 陳奎 生 教授二 零 零 九 年 五 月鄭州大學(xué) 20 09 屆碩士研 究生畢業(yè) 論文 欖香烯及 e IF 4E 反義寡核昔酸對人食管癌 EC一 l 細(xì)胞 中 e IF4 E、4E B P I 表達(dá)影響的研究用 ，以 eIF4E 為靶點的抗腫瘤治療 的研究 已引起人們 的關(guān)注 。Son i 等人研究發(fā)現(xiàn) ，在乳腺癌 中抑制 eIF4E 的表達(dá) 能有效抑制腫瘤 的

3、生長 ，同時檢測發(fā)現(xiàn) 4EBPI的表達(dá) 降低 。而在食管癌 中有關(guān)影響 eIF4E 、4EBPI 表達(dá) 的研究 尚未見有報 道 。反義寡核普 酸 (antisens。。 ligonucleotide，ASON)是指 能與靶 DNA 或 RNA以堿基配對 的原則相 結(jié)合 的一小段核昔酸序 列 。ASON 與靶 mR NA 上特 定序列 結(jié)合后 能有 效抑 制 或 阻斷 mRNA 的表達(dá) ，因此 ，反義技術(shù)近年來 己成 為抗腫瘤領(lǐng)域研究 的

4、熱 點 。欖 香烯 (E lemene )是從 中藥溫羲術(shù) 中提取 的一種有 效成分 ，化 學(xué)名為 1一 甲基一 1一 乙烯 基一 2， 4一 二異 丙基環(huán) 已烷， 具有抗腫瘤 作用 強(qiáng) 、毒 副作用 小等特 點 。欖 香烯 已應(yīng)用 于臨床 并有 顯著 的抗腫瘤作用 ，但其 具體 的抗腫 瘤機(jī)制 尚不清 楚 。本研 究 以人食 管癌 EC吸 細(xì)胞 為研 究對象 ，探求 eI F4E 反義寡核昔酸和欖 香烯 對人食管癌細(xì)胞 中 eI F4

5、E 、4EBPI 表達(dá) 的影 響 ，為食 管癌 的臨床 治療提供 理論依 據(jù) 。材 料 與方 法1. 人 食 管癌 EC一 細(xì) 胞 由香港 大 學(xué) 曹世 華 教授 惠贈 。2 . 食 管癌 EC一 1 細(xì) 胞 的培養(yǎng) : 食 管癌 EC一 1 細(xì)胞 以 10% 胎 牛血清 培養(yǎng)液 (含青 、鏈 霉 素各 loo u/ml )在 37 ℃、5%COZ條 件 下 貼 壁培養(yǎng) 。3. 轉(zhuǎn) 染 : 應(yīng) 用 Li po fus inx 脂質(zhì) 體將

6、 AS ODN s 轉(zhuǎn) 染 食 管癌 EC一 l 細(xì)胞 。4 . 應(yīng)用 免疫細(xì)胞化 學(xué) SP 法檢測 各實驗 組 、 對 照組 中 eI F4E 和 4EBPI 蛋 白的表達(dá)情況 。5 . 應(yīng)用 細(xì)胞 原位 雜交技術(shù)檢測各 實驗 組 、對照 組 中 。 IF4E 和 4EBPImR NA 的表 達(dá) 清 況 。6 . 統(tǒng) 計學(xué)處理 : 采用 SPSS10.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析 。計量 資料用均數(shù) 士標(biāo)準(zhǔn) 差 (又 士S) 表 示 ，兩 組