水中毒死蜱的D3降解菌固定化與酶促降解研究.pdf

1、毒死蜱是高毒有機(jī)磷農(nóng)藥的替代品種,被廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和生活中,隨著對(duì)毒死蜱毒理學(xué)研究的深入,毒死蜱對(duì)環(huán)境、人類以及動(dòng)物的危害逐漸被人們認(rèn)識(shí)。微生物降解是毒死蜱環(huán)境污染去除的有效方法之一,已經(jīng)越來(lái)越受到人們的重視,關(guān)于毒死蜱微生物降解的研究也不斷深入。本研究以農(nóng)藥毒死蜱作為主要的對(duì)象,以本實(shí)驗(yàn)室篩選的毒死蜱降解菌Rhodococcus rhodochrous(D3)為出發(fā)菌株,研究D3菌對(duì)毒死蜱等有機(jī)磷農(nóng)藥在水中的微生物降解,毒死蜱降解

2、菌D3的固定化方法和制備以及固定化微生物的特性,D3降解菌的降解酶提取和降解酶的特性。主要內(nèi)容如下： 1.降解譜試驗(yàn)研究得出:D3降解菌對(duì)對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、馬拉硫磷和殺螟硫磷的24 h降解率分別為99％、98％、88.7％、76.9％,在加菌濃度為107CFU·mL-1。條件下,降解半衰期分別為：3.830 h、3.501h、5.004 h、10.830 h。 2.研究了降解微生物的固定化方法。選取濕菌體量、固定劑Ca

3、Cl2濃度、包埋劑海藻酸鈉濃度和固定化時(shí)間為正交因素設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn),以固定化微生物對(duì)毒死蜱的降解率為考察指標(biāo),研究表明,固定化微生物的最佳固定化條件為：濕菌體量3.0 g、CaCl2濃度4％、海藻酸鈉濃度2％、鈣化時(shí)間8 h。 3.研究了固定化微生物對(duì)毒死蜱的降解特性。結(jié)果表明,固定化微生物對(duì)毒死蜱的最佳降解溫度為30℃,最佳pH為7.0,對(duì)毒死蜱有穩(wěn)定的吸附,無(wú)再次釋放,機(jī)械強(qiáng)度與傳質(zhì)性能較好。 4.初步研究了降解酶的提

4、取分離條件,進(jìn)行毒死蜱降解菌降解酶的定位與誘導(dǎo)性實(shí)驗(yàn),研究得出,降解酶主要是胞內(nèi)組成酶。 5.以牛血清白蛋白為標(biāo)準(zhǔn)蛋白,測(cè)得毒死蜱降解細(xì)菌D3胞內(nèi)粗提酶中可溶性蛋白質(zhì)含量為1.295mg·mL-1;該酶的米氏常數(shù)Km為0.7899mmol·L-1,最大反應(yīng)速率Vmax為0.14415μmol·min-1;在pH為6.5、溫度25℃的時(shí)候,降解酶對(duì)毒死蜱有最好的降解效果,保存在pn7.0、溫度10℃條件下,毒死蜱降解酶有最好的穩(wěn)定