2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)是一種由青霉屬和曲霉屬的真菌所產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物。其毒性大,分布廣,對(duì)農(nóng)產(chǎn)品污染重。飼料發(fā)生霉變會(huì)嚴(yán)重影響飼料業(yè)以及畜牧業(yè)的正常生產(chǎn),霉菌毒素的含量檢測(cè)對(duì)保障牲畜的健康以及肉制品的安全至關(guān)重要。分散式液液微萃取(DLLME)技術(shù)作為一種新型的樣品前處理技術(shù),具有操作簡(jiǎn)單、快速、有機(jī)溶劑用量少、成本低等優(yōu)點(diǎn)且兼具富集和凈化的作用。本文旨在建立基于DLLME-高效液相色譜法檢

2、測(cè)飼料及豬肉中赭曲霉毒素A的方法;并應(yīng)用該方法,對(duì)飼料生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的飼料中赭曲霉毒素A的污染程度及市售豬肉中OTA的蓄積水平進(jìn)行調(diào)查與分析。
  方法:
  1、實(shí)驗(yàn)條件
  1.1 OTA提取
  飼料樣品中OTA以甲醇-水的混合溶液超聲提取;豬肉樣品中OTA用甲醇、磷酸、氯化鈉溶液配成的混合溶液提取。
  1.2 OTA凈化及濃縮
  提取液經(jīng)離心、過濾后,取出1.00mL與萃取劑混合,用注射器將

3、混合液迅速注入乙酸溶液中,離心分離后移除上層水溶液,將沉積相氮吹至近干,再用甲醇復(fù)溶,進(jìn)行高效液相色譜分析。
  1.3 色譜條件
  使用的流動(dòng)相為乙腈和2%的乙酸溶液,流動(dòng)相流速為1.0mL/min;熒光檢測(cè)器檢測(cè)激發(fā)波長(zhǎng)為333nm,發(fā)射波長(zhǎng)477nm;柱溫30℃。依據(jù)保留時(shí)間定性,用峰面積外標(biāo)法定量。
  1.4 方法優(yōu)化
  多種因素會(huì)影響DLLME的萃取效率,本文對(duì)萃取劑的種類與體積、水相的pH與體積

4、等因素進(jìn)行了優(yōu)化;并對(duì)流動(dòng)相的組成及比例進(jìn)行優(yōu)化。
  1.5 質(zhì)量控制
  為保證分析質(zhì)量,本實(shí)驗(yàn)對(duì)方法的線性、檢出限、加標(biāo)回收率、日內(nèi)精密度和日間精密度等指標(biāo)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。
  2、飼料及豬肉中OTA含量調(diào)查
  本實(shí)驗(yàn)對(duì)來自全國(guó)部分省市自治區(qū)的飼料生產(chǎn)企業(yè)的飼料樣品麥麩、豆粕、棉粕、酒糟蛋白飼料(Distillers Dried Grains with Solubles,DDGS)中OTA含量進(jìn)行了調(diào)查。并

5、對(duì)濟(jì)南市的市售豬肉中OTA蓄積水平進(jìn)行了調(diào)查。
  結(jié)果:
  1.優(yōu)化的DLLME條件為:提取液經(jīng)離心、過濾后,取出1.00mL與200μL三氯甲烷混合,用注射器將混合液迅速注入5mL pH為3的乙酸溶液中,離心分離后移除上層水溶液,將沉積相氮吹至近干,再用甲醇復(fù)溶,進(jìn)行高效液相色譜分析。高效液相色譜流動(dòng)相:檢測(cè)飼料中OTA時(shí)乙腈與乙酸溶液的比例采用梯度洗脫程序,檢測(cè)豬肉中OTA時(shí)乙腈與乙酸溶液的比例為50∶50。

6、  2.本實(shí)驗(yàn)建立的檢測(cè)飼料及豬肉中赭曲霉毒素A的方法對(duì)飼料及豬肉樣品中OTA的平均加標(biāo)回收率均高于85%,且相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于5%。對(duì)于豬肉樣品,其檢出限為0.21μg/kg;對(duì)飼料樣品,檢出限為0.25μg/kg。
  3.所有飼料樣品中OTA總檢出率為46.7%,陽(yáng)性樣品中OTA平均檢出量1.8μg/kg,最高檢出量18μg/kg。均未超出國(guó)家規(guī)定的100μg/kg限量標(biāo)準(zhǔn)。不同種類飼料的檢測(cè)結(jié)果有差異,豆粕及棉粕中OTA檢出

7、率及檢出量相對(duì)較高。將飼料按照產(chǎn)地進(jìn)行分析,南方地區(qū)OTA檢出率及陽(yáng)性樣品平均檢出量高于北方地區(qū)和西北地區(qū)。
  4.所采集樣品中100%的品牌豬肉及88.9%的非品牌豬肉檢出有OTA蓄積。品牌豬肉中OTA的最高含量為2.2μg/kg,平均含量為0.37μg/kg。非品牌豬肉中OTA的最高含量為3.0μg/kg,平均含量為0.36μg/kg。品牌豬肉中OTA濃度分布較非品牌豬肉集中。所有樣品中OTA的含量均低于糧食中OTA的最高限

8、量5μg/kg。
  結(jié)論:
  1.本實(shí)驗(yàn)建立的DLLME與HPLC-FLD聯(lián)用測(cè)定飼料及豬肉中OTA含量的方法簡(jiǎn)便、靈敏。使用DLLME對(duì)樣品提取液進(jìn)行凈化及濃縮,大大減少了前處理過程中含氯有機(jī)溶劑的使用,減輕了對(duì)環(huán)境的危害,并保護(hù)了實(shí)驗(yàn)操作者的健康;同時(shí)簡(jiǎn)化了前處理過程,降低了分析成本。
  2.檢測(cè)發(fā)現(xiàn),飼料樣品中OTA的污染水平較低,低于國(guó)家限量標(biāo)準(zhǔn)。相比麥麩和DDGS,豆粕和棉粕較容易受到OTA污染。南方地

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