甘油型陽離子類脂的合成及性能研究.pdf

1、論文設(shè)計(jì)了一類甘油型陽離子類脂，合成共計(jì)8個化合物。建立了中間體N，N-二甲基-(2,3-雙烷氨基甲酸酯)丙胺及目標(biāo)分子的合成路線及工藝。經(jīng)重結(jié)晶分離提純后，得到了高純度的目標(biāo)產(chǎn)物，全部經(jīng)過ESI-MS、IR、1H NMR和13C NMR表征，證實(shí)產(chǎn)物結(jié)構(gòu)與設(shè)計(jì)相符，HPLC、MS純度達(dá)到轉(zhuǎn)染要求。
　　 采用所合成的陽離子類脂制備了陽離子脂質(zhì)體，采用動態(tài)光散射以及Zeta電位儀等手段對其進(jìn)行研究，初步得到陽離子類脂及由其所制備

2、出的陽離子脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)與性能的關(guān)系。
　　 利用瓊脂糖凝膠電泳研究了脂質(zhì)體與DNA的結(jié)合能力。結(jié)果表明，脂質(zhì)體與DNA的結(jié)合能力隨著脂質(zhì)體/DNA比例的增大而增加；DOPE的加入對脂質(zhì)體/DNA復(fù)合物的延滯作用有一定的影響；頭部結(jié)構(gòu)、平衡陰離子以及疏水尾鏈長度對陽離子脂質(zhì)體親水疏水平衡的影響使其與DNA的結(jié)合能力也表現(xiàn)出差異性。
　　 利用所制備的陽離子脂質(zhì)體作為基因運(yùn)載工具，轉(zhuǎn)運(yùn)質(zhì)粒DNA pGL3-control和p

3、GFP-N2,對MCF-7、Hep-2和HeLa三種細(xì)胞株進(jìn)行了體外轉(zhuǎn)染，研究了陽離子類脂結(jié)構(gòu)與其轉(zhuǎn)染效率之間的關(guān)系。結(jié)果表明：當(dāng)脂質(zhì)體與DNA比例發(fā)生變化時，其轉(zhuǎn)染效率也隨著改變，而且存在一個最佳比例(2/1～3/1附近)；轉(zhuǎn)染效率與陽離子類脂頭部平衡陰離子以及助類脂DOPE使用密切關(guān)聯(lián)而又復(fù)雜變化，在這些參數(shù)調(diào)節(jié)的陽離子脂質(zhì)體親水親脂平衡達(dá)到一種較好的狀態(tài)時可以得到滿意的轉(zhuǎn)染效果。與兩種商品化基因轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine2