版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、通常MHC Ⅰ類四聚體被用于定量分析表位特異的CDS<'+>T細胞。MHC Ⅰ類四聚體是由4個MHC Ⅰ類復(fù)合物和一個帶有熒光標(biāo)的親和素分子構(gòu)成的。其中每個MHC Ⅰ類復(fù)合物是由分別表達、純化的MHC分子的重鏈和β 2微球蛋白與表位肽在折疊緩沖液中共折疊所形成的。這種方法勢必會形成較多的多聚物和自身折疊產(chǎn)物,而且同時純化兩種單體是很費時的。為了解決這些問題,在本研究中,我們將串聯(lián)設(shè)計的人/鼠嵌合MHC分子的重鏈(HLA-A2 α1,HL
2、A-A2 α2,MHC-H2D α3)與β2微球蛋白克隆到pET17b載體上,并表達為融合蛋白。將融合蛋白與HLA-A2限制性表位肽兩者共折疊形成人/鼠嵌合MHC Ⅰ類復(fù)合物。這樣就會提高四聚體的得率,同時也可以節(jié)省大量時間。此外,我們還采用了凝膠遲滯的方法來檢測人/鼠嵌合MHC Ⅰ類復(fù)合物生物素化的效率。我們將最終形成的人/鼠嵌合四聚體用于體外定量檢測HLA-A2轉(zhuǎn)基因鼠上所產(chǎn)生的HLA-A2限制性細胞免疫水平。 由于缺少合適
3、的動物模型,在體內(nèi)對人乙肝疫苗免疫原性的臨床前評價一直受到了制約。在本研究中,我們構(gòu)建了同時表達HBV和HLA兩種基因的HBV/HLA-A2.1雙轉(zhuǎn)基因鼠。此雙轉(zhuǎn)基因鼠不僅表現(xiàn)出對HBV各種抗原的耐受,而且能夠有效地遞呈HLA-A2限制性抗原表位。我們用HLA-A2限制性HBc或HBs的表位疫苗免疫此雙轉(zhuǎn)基因鼠,借助CTL實驗、酶聯(lián)免疫斑點實驗和四聚體染色等手段證明此雙轉(zhuǎn)基因鼠能夠被有效的誘導(dǎo)出針對HLA-A2限制性HBe和HBs特異性
4、的免疫應(yīng)答。 總之,我們構(gòu)建的有生物活性的人/鼠嵌合四聚體以及HBV/HLA-A2.1雙轉(zhuǎn)基因鼠國內(nèi)外均未見報道。人.鼠嵌合四聚體能恰當(dāng)?shù)亩糠从矵LA-A2限制性細胞免疫水平。同時,HBV/HLA-A2.1雙轉(zhuǎn)基因小鼠能夠從多方面評價人乙肝疫苗的免疫原性:抗體的產(chǎn)生、γ干擾素的分泌水平、免疫小鼠的特異性CTL活性和有效降低體內(nèi)抗原水平。這些結(jié)果也進一步證明了HBV/HLA-A2.1雙轉(zhuǎn)基因小鼠作為評價人乙肝病毒疫苗免疫原性動物
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 預(yù)防乙肝及乙肝疫苗知識
- 乙肝疫苗副作用
- 乙肝疫苗ppt課件
- 乙肝疫苗接種常識
- 博爾納乙肝疫苗
- 乙肝疫苗失敗影響因素研究.pdf
- 乙肝疫苗有效期
- 卡介苗乙肝疫苗接種技術(shù)要求ppt課件
- Markov模型在乙肝疫苗經(jīng)濟學(xué)評價中的應(yīng)用.pdf
- 殼聚糖衍生物納米顆粒在乙肝疫苗中的應(yīng)用研究.pdf
- 乙肝疫苗應(yīng)答的母源性免疫傳遞研究.pdf
- 玉環(huán)縣兒童乙肝疫苗加強免疫效果評價.pdf
- 基因工程乙肝疫苗的制備
- 基因工程藥物的研究現(xiàn)狀乙肝疫苗
- 利用轉(zhuǎn)基因煙草生產(chǎn)乙肝疫苗的研究.pdf
- 乙肝病毒母嬰阻斷技術(shù)與乙肝疫苗預(yù)防接種規(guī)范管理
- 重慶地區(qū)兒童乙肝疫苗免疫效果評價和持久性分析.pdf
- 重組酵母乙肝疫苗不同免疫方案阻斷乙肝病毒母嬰傳播的效果評價.pdf
- 北侖區(qū)乙肝患者家屬主動接種乙肝疫苗現(xiàn)狀及其影響因素的調(diào)查.pdf
- 我國乙肝疫苗現(xiàn)狀及存在的問題
評論
0/150
提交評論