LMP-1在年輕恒牙和成熟恒牙的牙髓及牙乳頭中的表達(dá).pdf

1、目的：
　　 在牙齒發(fā)育期間，牙乳頭間充質(zhì)細(xì)胞分化為成牙本質(zhì)細(xì)胞，形成原發(fā)性牙本質(zhì)；在牙齒萌出后，無(wú)論年輕恒牙，還是成熟恒牙，牙髓在受創(chuàng)傷和感染時(shí)，牙髓組織中的成牙本質(zhì)細(xì)胞和新分化的成牙本質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞就會(huì)形成第三期牙本質(zhì)，表明牙髓組織具有較強(qiáng)的自我防御能力和自身修復(fù)潛能。關(guān)于成牙本質(zhì)細(xì)胞和成牙本質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞的分化以及牙本質(zhì)形成的確切機(jī)制還不完全清楚，但目前認(rèn)為一些生物分子如轉(zhuǎn)錄因子、信號(hào)分子、生長(zhǎng)因子、細(xì)胞外基質(zhì)分子等參與調(diào)節(jié)牙

2、髓組織中的細(xì)胞增殖、分化和基質(zhì)合成。
　　 LIM礦化蛋白1（LIM mineralization protein-1，LMP-1）是LIM結(jié)構(gòu)域蛋白家族成員，是一種胞內(nèi)非分泌蛋白，它廣泛存在于各種組織中。LMP-1調(diào)控成骨細(xì)胞的分化和成熟以及骨的形成。近年來(lái)有文獻(xiàn)報(bào)道LMP-1在人健康成熟牙髓牙本質(zhì)復(fù)合體中的前期牙本質(zhì)、成牙本質(zhì)細(xì)胞、未礦化的修復(fù)性牙本質(zhì)、成牙本質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和牙髓成纖維細(xì)胞中均有表達(dá)；提示LMP-

3、1在牙髓細(xì)胞和成牙本質(zhì)細(xì)胞的分化，牙本質(zhì)基質(zhì)的礦化中起著重要作用。但目前有關(guān)LMP-1在年輕恒牙和成熟恒牙牙髓及牙乳頭組織中表達(dá)差異的研究未見(jiàn)報(bào)道。而對(duì)這一問(wèn)題的深入研究和探討，將有助于我們進(jìn)一步認(rèn)識(shí)牙髓牙本質(zhì)復(fù)合體的發(fā)育、成熟以及年輕恒牙牙髓修復(fù)能力的生物學(xué)機(jī)制，并為臨床研究活髓保存治療技術(shù)提供新的思路。
　　 本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用RT-PCR和Western-blot技術(shù)，首次檢測(cè)并比較LMP-1在人年輕恒牙和成熟恒牙牙髓及牙乳頭組織

4、中的表達(dá)，以探尋其在牙髓牙本質(zhì)復(fù)合體發(fā)育和成熟中的作用，為臨床探尋新的活髓保存治療方法提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　 材料和方法：
　　 收集48例因正畸或阻生拔除的健康無(wú)齲的牙齒，研究對(duì)象年齡為11～30歲，均無(wú)全身系統(tǒng)性疾病，近三個(gè)月未曾服用免疫制劑和抗菌藥物。牙齒拔除后立即將年輕恒牙的牙乳頭用鑷子分離，凍存；然后將牙齒縱向劈開(kāi)，完整取出牙髓組織，凍存。成熟恒牙直接將牙齒縱向劈開(kāi)，完整取出牙髓組織，凍存。
　　

5、 按恒牙牙根發(fā)育的八個(gè)階段，結(jié)合臨床和X光片檢查，將R2/3，R3/4的年輕恒牙的牙乳頭組織歸為第1組，共24例；將112/3，113/4的年輕恒牙的牙髓組織歸為第2組（根尖孔未閉合組，根尖孔呈喇叭口狀），共24例；將Ac的成熟恒牙的牙髓組織歸為第3組（根尖孔閉合組），共24例；（R2/3代表牙根形成2/3；R3/4代表牙根形成3/4；Ac代表根尖已封閉）。每組中有12例樣本用于RT-PCR檢測(cè)，另12例樣本用于Western-blo

6、t檢測(cè)。
　　 采用RT-PCR和Western-blot技術(shù)對(duì)LMP-1進(jìn)行基因水平和蛋白水平的檢測(cè)，采用SPSS11.0軟件包，應(yīng)用單因素方差分析方法對(duì)圖像分析的結(jié)果（即灰度值）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 無(wú)論是在mRNA水平還是在蛋白質(zhì)水平，LMP-1在年輕恒牙的牙乳頭組織、年輕恒牙的牙髓組織和成熟恒牙的牙髓組織中均有表達(dá)，但表達(dá)強(qiáng)度不同。LMP-1