鐮形棘豆生物堿成分研究及毒性評價.pdf

1、鐮形棘豆(Oxytropis falcate Bunge)藏藥中稱為“達夏”，系豆科(Lgguminosae)棘豆屬(Oxytropis)多年生草本植物。具有廣闊的藥用開發(fā)前景。對于鐮形棘豆的化學成分的報道較多，但對其毒性的研究則未見報道。本試驗運用化學成分的系統(tǒng)預試和薄層色譜技術，初步確定鐮形棘豆中化學成分種類。通過致突變試驗、亞慢性毒性試驗及生殖試驗來對鐮形棘豆的毒性進行研究和評價，以證明鐮形棘豆具有跟瘋草植物一樣的毒性提供有力的論

2、據，也為鐮形棘豆藥物的開發(fā)提供更加深入的資料。研究獲得以下結果： 1.鐮形棘豆化學成分的預試驗及生物堿薄層色譜分析利用系統(tǒng)預試和專項預試相結合對鐮形棘豆所含的化學成分進行了預試驗，結果表明鐮形棘豆中含有酚類、鞣質、生物堿、黃酮及其苷類、糖、多糖及其苷類、氨基酸及多肽、皂甙、有機酸、甾體和三萜類物質、揮發(fā)油；不含葸醌及其苷類、內酯、香豆素及其苷類、強心甙、氰甙及脂肪族硝基化合物。 對鐮形棘豆生物堿進行系統(tǒng)提取，通過選擇適宜

3、的展開系統(tǒng)對各萃取段生物堿薄層色譜分析，結果表明，鐮形棘豆中主要是吲哚里西啶類生物堿，且以大極性成分為主，同時也含有少量的中、小極性生物堿。氯仿部分有6種生物堿，乙酸乙酯部分有11種生物堿，正丁醇部分有5種生物堿。經與苦馬豆素標準品對照，鐮形棘豆各萃取部分均含有苦馬豆素，并從正丁醇部分分離得到28 mg苦馬豆素，提取率0.00187％。 2.鐮形棘豆正丁醇提取物致突變試驗選用苦馬豆素含量最高的正丁醇萃取物，配制成800 mg/k

4、g、1 000 mg/kg、2 000 mg/kg、4 000 mg/kg四個梯度的水溶液，運用骨髓微核試驗與精子畸形試驗進行致突變性評價，結果表明，鐮形棘豆正丁醇萃取物引起小鼠骨髓嗜多染紅細胞的微核率分別為2.625％0、4.625％0、6.50％0和12.75％0；及精子畸形率為1.44％、1.99％、3.40％和3.475％;且存在劑量-效應關系，也就是說低濃度的時候對機體是安全的，劑量在2 000 mg/kg以下是安全范圍，不引

5、起微核及精子畸形發(fā)生率的升高；而高濃度時會引起突變發(fā)生率的顯著升高，具有致突變性。 3.鐮形棘豆全草亞急性毒性試驗通過給小鼠飼喂添加了鐮形棘豆全草的飼料，對小鼠的臨床癥狀觀察，血液常規(guī)系數的檢測，外周血T細胞及腹腔巨噬細胞吞噬功能的檢查、內臟組織器官的剖檢，研究鐮形棘豆全草對小鼠的影響。結果表明，鐮形棘豆全草對白細胞數及血紅蛋白有一定的影響，而對紅細胞、淋巴細胞的影響不顯著。實驗組小鼠的外周血T淋巴細胞ANAE陽性率分別為8.4

6、％、15％和18.5％，與對照組比較差異顯著(P<0.05)，而對巨噬細胞的非特異性吞噬功能的影響則是低含量有促進作用；而高含量則有抑制作用，試驗組巨噬細胞吞噬指數分別為0.86、0.4.7和0.32。鐮形棘豆全草還能使小鼠各種器官細胞出現空泡變性。 4.鐮形棘豆全草生殖毒性試驗鐮形棘豆全草飼料喂養(yǎng)小鼠進行三段生殖毒性試驗，結果顯示鐮形棘豆對懷孕動物體增重的有著顯著的影響，草粉含量越高懷孕動物體增重的差異越顯著(P<0.05)，引起胚胎