雷公藤內(nèi)酯醇對(duì)小鼠前列腺癌作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的： 本實(shí)驗(yàn)在應(yīng)用導(dǎo)師經(jīng)驗(yàn)方治療前列腺癌取得較好臨床效果基礎(chǔ)上，通過體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)，探討方中有效抗癌成分雷公藤內(nèi)酯醇對(duì)小鼠前列腺癌細(xì)胞株RM-1和小鼠前列腺癌模型的增殖抑制作用及其可能機(jī)制，以期為臨床提供安全有效的抗前列腺癌藥物。 方法： 體外實(shí)驗(yàn)采用小鼠前列腺癌RM-1傳代細(xì)胞，用MTT 實(shí)驗(yàn)檢測TL對(duì)RM-1細(xì)胞的增殖抑制作用；用吖啶橙熒光染色檢測TL對(duì)RM-1凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)影響；用流式細(xì)胞術(shù)分析TL對(duì)RM

2、-1細(xì)胞周期及凋亡峰的作用；用梯狀電泳方法檢測TL對(duì)RM-1細(xì)胞DNA的凋亡作用；用RT-PCR法檢測TL對(duì)RM-1細(xì)胞 caspase-3、bcl-2 mRNA表達(dá)水平的影響。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)采用C57BL/6小鼠皮下注射RM-1細(xì)胞，建立前列腺癌動(dòng)物模型，檢測腫瘤體積和重量計(jì)算腫瘤生長抑制率；TUNEL技術(shù)檢測前列腺癌組織中凋亡細(xì)胞；免疫組化檢測方法觀察藥物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腫瘤組織 caspase-3基因及其蛋白bcl-2表達(dá)水平的影響。

3、 結(jié)論： 1．TL抑制小鼠前列腺癌細(xì)胞株RM-1增殖，并呈一定的時(shí)間和劑量依賴性。 2．TL抑制小鼠體內(nèi)前列腺癌細(xì)胞生長。 3．TL誘導(dǎo)RM-1細(xì)胞凋亡。 4．TL誘導(dǎo)小鼠體內(nèi)前列腺癌細(xì)胞凋亡。 5．TL抑制腫瘤增長作用是通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡實(shí)現(xiàn)的。 6．TL提高RM-1細(xì)胞caspase-3并降低bcl-2mRNA表達(dá)。 7．TL提高小鼠體內(nèi)前列腺癌細(xì)胞caspase-3并降低bcl