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1、目的:研究?jī)龃嫒四殠чg充質(zhì)干細(xì)胞(hUC-MSCs)異體移植對(duì)新生大鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBD)的修復(fù)作用。
方法:96只7日齡SD新生大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組(n=24)、HIBD組(n=24)、新鮮hUC-MSCs移植組(n=24)、凍存hUC-MSCs移植組(n=24),HIBD組和移植組Rice法制作HIBD模型,術(shù)后3天分別將相同體積的生理鹽水、新鮮、低溫凍存復(fù)蘇的hUC-MSCs經(jīng)立體定向儀移植到乳鼠左側(cè)腦室。
2、注射前48小時(shí)(5-溴脫氧尿苷)Brdu標(biāo)記細(xì)胞。術(shù)后通過(guò)組織切片HE染色、免疫熒光染色鑒定細(xì)胞的存活,感覺運(yùn)動(dòng)功能測(cè)試,腦大體病變觀察評(píng)定大鼠功能恢復(fù)情況。
結(jié)果:1.復(fù)蘇后hUC-MSCs增長(zhǎng)速度較新鮮hUC-MSCs明顯增快,且先進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期;2.移植后腦組織HE染色結(jié)果顯示:細(xì)胞移植組與HIBD組比較,海馬及大腦皮質(zhì)區(qū)的神經(jīng)元及少突膠質(zhì)細(xì)胞明顯增多,組織結(jié)構(gòu)相對(duì)清晰;3.免疫熒光結(jié)果顯示,移植后的hUC-MSCs
3、可以存活并向損傷部位遷移,并在組織中存活至少4周;4.感覺運(yùn)動(dòng)功能測(cè)試結(jié)果顯示:四組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),移植組較HIBD組有明顯改善(P<0.05),兩個(gè)移植組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);5.移植組腦病變率低于HIBD組(P<0.05),而兩個(gè)移植組比較腦病變率無(wú)明顯差異(P>0.05)。
結(jié)論:凍存hUC-MSCs復(fù)蘇后仍具有活躍的增殖和分化潛能,異體移植治療新生大鼠HIE,可促進(jìn)大鼠感覺運(yùn)
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