SSTR2A、SSTR5與EGFR蛋白在非小細胞肺癌中的表達及其意義.pdf

1、一、研究背景 肺癌是世界上最常見的五大惡性腫瘤之一：且發(fā)病率和死亡率近年來迅速上升，躍居腫瘤第一位。雖然治療技術上有了很大的提高，但5年生存率沒有明顯改善。目前非小細胞肺癌的治療除手術、化療、放療及免疫治療外，針對于不同靶點的分子靶向治療正逐漸應用于臨床。 生長抑素受體(Somatostatin receptor，SSTR)作為基因的腫瘤標記物之一，正逐步受到研究者的重視。隨著生長抑素受體5種亞型先后被克隆，人們對生長抑

2、素受體家族各成員的氨基酸序列、分子生物學特性、在正常組織和腫瘤組織中的分布和表達及其特異性配體等方面的研究也進一步深化。既往通過對腫瘤標本組織切片，以放射自顯影法及腫瘤勻漿的配體結合分析法觀察，證實在多種神經內分泌腫瘤中存在著SSTR的高密度表達。90年代以來，采用先進的分子生物學技術，檢測SSTR各亞型的mRNA(包括原位雜交法、RT-PCR法及Norhern印記法等)，發(fā)現(xiàn)SSTR在各類內分泌腫瘤中的表達陽性率在7096以上。近年來

3、通過放射免疫顯像發(fā)現(xiàn)除神經內分泌腫瘤外，一些非神經內分泌腫瘤中(如乳腺癌、非小細胞肺癌和結腸癌等)中均含有足以進行閃爍顯像的高密度SSTR。為腫瘤的定位診斷、鑒別診斷及腫瘤受體的靶向藥物治療提供了有效依據(jù)。關于SST抗腫瘤增殖的機理，認為系由存在于瘤細胞中的SSTR直接介導抑制生長因子受體激酶的有絲分裂信號，從而導致腫瘤生長停滯或腫瘤細胞凋亡，或通過腫瘤周血管壁內高密度表達的SSTR抑制血管形成和促進血管強烈收縮，以及調節(jié)免疫細胞等環(huán)節(jié)

4、發(fā)揮抑癌效應。SST有可能作為一種重要的細胞增殖和分化的激素調節(jié)肽，其抑制腫瘤細胞增殖的效應，將使SST及其多種類似物(SSA)，具有發(fā)展成為抗腫瘤藥物的樂觀前景。EGFR在多種惡性腫瘤包括非小細胞肺癌中高表達，與腫瘤細胞的增殖、腫瘤血管生成、黏附、侵襲、轉移和腫瘤細胞的凋亡等密切相關。由于EGFR酪氨酸激酶是信號傳導的必要條件，因而成為腫瘤治療的重要靶分子。本研究通過免疫組織化學的方法檢測SSTR亞型SSTR2A、SSTR5與表皮生長

5、因子受體(Epidermal growth factot receptor； EGFR)在非小細胞肺癌(non-small-cell lung cancer;NSCLC)組織和癌旁正常肺組織中的表達，探討與臨床病理因素之間的關系，及兩者之間的相關性和預后生存期的隨訪。為非小細胞肺癌的靶向治療提供新的治療思路。二、研究對象和方法1、研究對象：收集濟南軍區(qū)總醫(yī)院胸外科及齊魯醫(yī)院1999年8月至2005年2月行根治性手術切除并經病理證實的非小

6、細胞肺癌石蠟標本69例，研究組(62例)：非小細胞肺癌組織；對照組(7例)：癌旁肺組織7例(距腫塊10cm以上)。 二、實驗方法：所有標本均經10﹪福爾馬林固定，石蠟包埋，連續(xù)切片，采用兔抗人SSTR2A多克隆抗體、SSTR5多克隆抗體和EGFR單克隆抗體免疫組織化學標記、以DAB顯色系統(tǒng)顯色，來顯示石蠟切片中SSTR2A、SSTR5和EGFR蛋白的表達。運用統(tǒng)計學方法分析各組數(shù)據(jù)，結合臨床病理資料(腫瘤的大小、患者年齡、性別、

7、腫瘤組織類型、TNM分期、淋巴結轉移等)，探討三種蛋白在62例NSCLC組織和7例癌旁正常肺組織中的表達情況及與肺癌臨床病理特征的關系，并進行預后隨訪。 三、結果：切片組織中SSTR2A表達呈細胞膜棕黃色的顆粒狀分布，SSTR5表達定位于細胞漿和細胞膜上，EGFR染色主要分布于細胞膜和細胞漿，呈彌漫性或顆粒性著色。 1、7例癌旁肺組織中未發(fā)現(xiàn)EGFR蛋白的表達；SSTR2A和SSTR5的在癌旁肺組織中的陽性表達率分別為1

8、/7和2/7。 2、62例非小細胞肺癌組織中，SSTR2A蛋白陽性表達30例，占48.3﹪；SSTR5陽性表達44例，占70.9﹪。EGFR有35例陽性，占56.4﹪； 3、SSTR2A、SSTR5蛋白表達與NSCLC的TNM分期有密切關系(P(0.05)。但與NSCLC患者的年齡、性別、吸煙與否、病理類型、腫瘤大小和淋巴結轉移均無明顯相關(P>0.05)。同組中， EGFR蛋白的表達與非小細胞肺癌患者的年齡、性別、吸煙

9、與否、腫瘤組織類型、腫瘤大小、TNM分期、病理分級及淋巴結轉移均無顯著差異(P>0.05)。SSTR2A、SSTR5蛋白表達與EGFR蛋白的表達呈負相關關系。 4、SSTR2A表達陽性組的3年生存率為64.52﹪，高于陰性組45.16﹪，Log-rank檢驗：4.56。兩者差異有統(tǒng)計學意義(P(0.05)。SSTR2A陰性組的中位生存期為32個月，低于陽性組的中位生存期36個月(P=0.326，P>0.05)。SSTR5表達陽性

10、組的3年生存率為65.91﹪，高于陰性組22.22﹪，Log-rank檢驗：4.01(P<0.05)。兩者差異有統(tǒng)計學意義。SSTR5表達陰性組的中位生存期為32個月，低于陽性組的中位生存期40個月(P=0.453，P>0.05)。EGFR表達陰性組3年生存率為69.44﹪高于陽性者30.77﹪’Log-rank檢驗：12.41。兩者差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。EGFR表達陽性組的中位生存期為24個月，低于陰性組的中位生存期50個