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文檔簡介
1、目的:用Nogo-A干預分化后的PC-12細胞,觀察其細胞內(nèi)磷酸化蛋白激酶B(protein kinaseB,PKB)表達情況,探討Nogo-A抑制中樞神經(jīng)再生的信號轉導通路中是否有PKB的參與。 方法:將培養(yǎng)的細胞分成三組。對照組1:PC-12細胞經(jīng)高糖型DMEM完全培養(yǎng)基培養(yǎng)12天;對照組2:PC-12細胞經(jīng)含神經(jīng)生長因子(50ng/ml)的高糖型DMEM完全培養(yǎng)液培養(yǎng)10天后,高糖型DMEM完全培養(yǎng)基培養(yǎng)2天;試驗組:PC
2、-12細胞經(jīng)含神經(jīng)生長因子(50ng/ml)的高糖型DMEM完全培養(yǎng)液培養(yǎng)10天,高糖型DMEM完全培養(yǎng)基培養(yǎng)2天后,加入Nogo-A干預。實驗組又分別根據(jù)加入Nogo-A的濃度和干預時間分2個小組。實驗組1分別加入50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L終濃度的Nogo-A干預30min,實驗組2加入200nmol/L終濃度的Nogo-A分別干預10min,30min,90min。應用蛋白印跡方法檢測Nogo-A干預后
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