Gadd45a高表達(dá)對(duì)胰腺癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響.pdf

1、惡性腫瘤嚴(yán)重威脅人類健康，亟需發(fā)展多種治療方法改善腫瘤的預(yù)后。Gadd45a，在生長(zhǎng)抑制和DNA損傷中具有重要作用，參與細(xì)胞生長(zhǎng)的負(fù)性調(diào)控，瞬時(shí)轉(zhuǎn)染Gadd45家族成員(Gadd45a，Gadd45g)可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡產(chǎn)生。 本研究以腺病毒為載體，將Gadd45a導(dǎo)入胰腺癌細(xì)胞分析Gadd45a對(duì)胰腺癌細(xì)胞產(chǎn)生的生物學(xué)影響，分析Gadd45a對(duì)不同作用機(jī)制化療藥物的增效作用以及細(xì)胞p53狀態(tài)對(duì)Gadd45a表達(dá)的影響；驗(yàn)證了

2、Ad—G45a在裸鼠PANC1移植瘤上的抑制作用。成功構(gòu)建了表達(dá)Gadd45a的重組腺病毒Ad—G45a，經(jīng)感染在四種人胰腺癌細(xì)胞(MIA PaCa—2，P3，PANC1，SW1990)中均可高效率表達(dá)。經(jīng)測(cè)序分析未發(fā)現(xiàn)四種胰腺癌細(xì)胞的Gadd45a的cDNA有突變；在四種胰腺癌細(xì)胞系中PANC1的Gadd45a本底表達(dá)最高，但與細(xì)胞的惡性度沒有明顯相關(guān)性。以PANC1為研究對(duì)象，將Ad—G45a導(dǎo)入細(xì)胞后，細(xì)胞生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移等惡性表

3、型均受到明顯抑制；Ad—G45a誘導(dǎo)細(xì)胞G2/M期阻滯具有明顯的時(shí)效性和量效性；通過DAPI染色，annexinV，Westernblot等方法證實(shí)Gadd45a導(dǎo)入PANC1后通過激活Caspase9，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。在PANC1細(xì)胞中證實(shí)Ad—G45a與化療藥物(cDDP，VP—16，5FU)合用有協(xié)同作用，以cDDP協(xié)同效應(yīng)最為顯著。外源Gadd45a的導(dǎo)入可提高野生型p53的表達(dá)水平，并誘導(dǎo)p53依賴的內(nèi)源Gadd45a表達(dá)；VP