免疫球蛋白IgG對實驗性癲癇模型影響的機制探討.pdf

1、目的： 癲癇(Epilepsy)是小兒中樞神經(jīng)系統(tǒng)常見疾病之一，臨床表現(xiàn)為突然短暫發(fā)作的腦功能異常，發(fā)病機制復雜、類型多樣、治療困難。 國內(nèi)外研究證明癲癇與免疫有密切的關(guān)系，不少學者臨床上應(yīng)用靜脈注射用人免疫球蛋白(Human IntravenotIs Immunoglobulin，IVIG)治療癲癇，結(jié)果發(fā)現(xiàn)IVIG對部分癲癇有效，但其治療癲癇的機制目前仍不清楚，且相關(guān)研究多基于臨床觀察，動物實驗研究報道很少。

2、 本研究擬在建立腹腔注射印防已毒(Picrotoxin，PTX)點燃癲癇動物模型的基礎(chǔ)上，研究免疫球蛋白對癲癇的治療作用，探討其治療癲癇的機制，為臨床治療癲癇提供理論依據(jù)。 方法： 用腹腔注射PTX(2mg/kg)點燃Wistar大鼠以建立癲癇動物模型。49只大鼠隨機分為兩組：PTX組(A組，n=41)、正常對照組(B組，n=8)。PTX組(A組)腹腔注射PTX2mg/kg．d，連續(xù)14d；正常對照組(B組)不作處理。在

3、實驗第14d，PTX組(A組)根據(jù)實驗點燃結(jié)果分為兩組：完全點燃組(A1+A2組，n：26)，未完全點燃組(A3組，n=13)；再從完全點燃組中隨機分為兩組：完全點燃1組(A1組，n=16)，完全點燃2組(A2組，n=10)。完全點燃2組(A2組)腹腔注射PTX 2mg/kg．d，連續(xù)14d；完全點燃1組(A1組)再隨機分為兩組：丙球治療組(A1t組，n=8)、治療對照組(Alc組，n=8)。丙球治療組(A1t組)腹腔注射PTX2mg/

4、kg．d，連續(xù)17d，第14d在PTX 60分鐘后開始尾靜脈注射IVIG500mg/kg．d，連用4d；治療對照組(A1c組)腹腔注射PTX 2mg/kg．d，連續(xù)17d，第14d在PTX 60分鐘開始后尾靜脈注射與IVIG同等體積生理鹽水，連用4d。每日對大鼠進行驚厥強度進行評級，在實驗PTX注射結(jié)束24小時后取海馬腦組織及外周血，然后制作海馬腦組織勻漿，ELISA法檢測勻漿細胞因子IFN-γ、IL-6的水平，同時用ELISA檢測外周

5、血神經(jīng)元特異性烯醇酶(Neuron specific enolase，NSE)的水平。 結(jié)果： 1.腹腔注射PTX點燃大鼠癲癇動物模型的建立：PTX組(A組)在實驗14d內(nèi)死亡2只；實驗14d內(nèi)完全點燃27只，完全點燃率約65.85％。 2.實驗14d內(nèi)PTX組的體重變化：正常對照組(B組)平均體重隨著日齡增加而增加；PTX組，包括完全點燃組(Al+A2組)、未完全點燃組(A3組)平均體重也隨著日齡增加而增加，但

6、增速明顯較正常對照組減慢，結(jié)果有統(tǒng)計學意義；而完全點燃組和未完全點燃組兩組比較無統(tǒng)計學差異。 3.完全點燃2組(A2組)和未完全點燃組(A3組)大鼠血清NSE及海馬腦組織細胞因子變化：A2組、A3組兩組血清NSE水平均較B組明顯增高，結(jié)果有統(tǒng)計學意義，而A2組和A3組比較無統(tǒng)計學差異。A2組、A3組兩組海馬腦組織IFN—γ含量均較B組明顯增高，結(jié)果有統(tǒng)計學意義，而A2組和A3組比較無統(tǒng)計學差異。A2組、A3組、B組的IL-6含量

7、兩兩比較均無統(tǒng)計學差異。 4.IVIG對癲癇的治療效果：實驗第14～17d期間，Alt組的驚厥強度較Alc組有減弱；潛伏期前者較后者長；第17天注射PTX 60分鐘后仍有抽搐發(fā)作的大鼠例數(shù)前者較后者少，結(jié)果均有統(tǒng)計學意義。IVIG治療后，Alt組和Alc組血清NSE水平較B組仍有明顯升高，Alc組血清NSE水平較Alt組有明顯升高，結(jié)果均有統(tǒng)計學意義。Alt組和Alc組海馬腦組織IFN-γ含量較B組有明顯升高，Alc組海馬腦組織

8、IFN-γ含量較Alt組有明顯升高，結(jié)果有統(tǒng)計學意義。Alt組、Alc組、B組的海馬腦組織IL-6含量兩兩比較均無統(tǒng)計學差異。 結(jié)論： 1.用腹腔注射PTX(2mg/kg．d×14d)點燃Wistar大鼠，可以成功建立癲癇動物模型，完全點燃率為65.85％。 2.免疫球蛋白治療可降低癲癇大鼠血清NSE水平，提示免疫球蛋白對癲癇大鼠神經(jīng)元有保護作用。 3.免疫球蛋白對控制大鼠癲癇發(fā)作具有明顯療效，能減少癲癇