陽虛質(zhì)理論及其外周血基因表達(dá)譜研究.pdf

1、目的:構(gòu)建陽虛質(zhì)的理論體系；檢測陽虛質(zhì)的外周血基因表達(dá)譜，揭示其分子機(jī)制。 方法:檢索600余部古代文獻(xiàn)及大量現(xiàn)代文獻(xiàn)中有關(guān)陽虛質(zhì)的論述，對陽虛質(zhì)的概念、成因、特征、診斷、干預(yù)方法進(jìn)行研究，形成陽虛質(zhì)的理論基礎(chǔ)。在臨床流行病學(xué)調(diào)查的基礎(chǔ)上，選擇8例典型陽虛質(zhì)和6例典型平和質(zhì)受試對象，抽取空腹靜脈血各10ml，分離白細(xì)胞，提取總RNA，純化后進(jìn)行單輪擴(kuò)增，生物素標(biāo)記cRNA，用Affymetrix公司生產(chǎn)的U133+2.0芯片檢測

2、基因表達(dá)譜。以平和質(zhì)作為對照，用SAM分析陽虛質(zhì)的差異表達(dá)基因，對差異表達(dá)基因進(jìn)行GO注釋和pathway分析并進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，對差異表達(dá)基因的生物學(xué)功能進(jìn)行評價(jià)，從基因水平闡明陽虛質(zhì)成因、特征及其發(fā)病傾向性的機(jī)制。 結(jié)果:陽虛質(zhì)成因與稟賦不足、胎養(yǎng)不當(dāng)?shù)认忍煲蛩丶吧鐣h(huán)境、飲食習(xí)慣、疾病影響、醫(yī)過等后天因素密切相關(guān)；陽虛質(zhì)的特征性表現(xiàn)為寒象(身寒、代謝物澄徹清冷、畏食生冷)、面白體胖及脈微等；在發(fā)病傾向上易患虛寒證、寒濕證、血

3、瘀證，對痰飲、腫脹、泄瀉、陽痿等具有易患性；對陽虛質(zhì)的診斷應(yīng)在研究文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，結(jié)合專家臨床經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行量化診斷；陽虛質(zhì)的調(diào)理原則為用甘溫藥溫補(bǔ)陽氣，或用溫陽散寒藥溫補(bǔ)命門陽氣，應(yīng)注意陰陽、精氣的互生。 與平和質(zhì)比較，當(dāng)fold change>2.0或fold change<1/2時(shí)，陽虛質(zhì)共有1 739基因位點(diǎn)表達(dá)上調(diào)，其中表達(dá)上調(diào)的位點(diǎn)785個(gè)，下調(diào)的位點(diǎn)957個(gè)。按q<0.05進(jìn)行篩選，上調(diào)基因有684個(gè)位點(diǎn)，下調(diào)基因有920

4、個(gè)位點(diǎn)。共有267個(gè)差異表達(dá)的基因位點(diǎn)可進(jìn)行GO注釋或pathway分析且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中表達(dá)上調(diào)的位點(diǎn)150個(gè)，下調(diào)的位點(diǎn)117個(gè)，涉及GO通路48個(gè)、KEGG通路3個(gè)、GenMAPP通路9個(gè)。表達(dá)上調(diào)的基因主要涉及炎癥相關(guān)基因、環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白基因CREB及環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件調(diào)節(jié)蛋白基因CREIll等，表達(dá)下調(diào)的基因主要是與遺傳信息傳遞相關(guān)的基因及亞甲基四氫葉酸還原酶基因MTHFR等。 結(jié)論:陽虛質(zhì)理論體系對指導(dǎo)