TGF-β1調(diào)控頭頸鱗癌上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化及其侵襲的實驗研究.pdf

1、目的：研究表明,上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial to mesenchymaltransition,EMT)在上皮源性腫瘤轉(zhuǎn)移中起著十分重要的作用。近年來,EMT在頭頸鱗癌中也得到證實,但其形成的分子機制并不十分清楚。由于轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β1)調(diào)控多種腫瘤EMT形成并與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān),成為研究的重點,本研究應用TGF-β1刺激頭頸鱗癌細胞,觀察刺激后細胞EMT相關(guān)表現(xiàn)及其侵襲情況,并進一步探討相關(guān)機制。
　　 方法：⑴不

2、同濃度TGF-β1刺激頭頸鱗癌細胞Tu686后,MTT法檢測細胞生長增殖情況；⑵不同濃度TGF-β1刺激頭頸鱗癌細胞Tu686后,于不同時間點觀察細胞形態(tài)變化,RT-PCR及Western-blot檢測上皮細胞標志物E-cadherin及間質(zhì)細胞標志物Vimentin表達情況,同時檢測TGF-β1信號通路中Smad2、p-Smad2表達情況；⑶劃痕實驗及Transwell侵襲小室實驗比較TGF-β1刺激前后Tu686細胞遷移及侵襲潛能的

3、變化；⑷用siRNA沉默Smad2后,Western-blot檢測EMT標志蛋白E-cadherin表達水平,Transwell侵襲小室實驗比較Tu686細胞侵襲能力的改變。
　　 結(jié)果：①TGF-β1對頭頸鱗癌細胞Tu686生長增殖無顯著影響；②TGF-β1刺激后,Tu686細胞發(fā)生形態(tài)學改變,表現(xiàn)為細胞間松散,細胞形態(tài)不規(guī)則,有偽足形成；③TGF-β1刺激后,Tu686細胞上皮性標志物E-cadherin表達下調(diào),而間質(zhì)性標

4、志物Vimentin表達增強,且具有濃度和時間依賴性；同時檢測到p-Smad2表達也增強,而Smad2表達基本不變；④TGF-β1刺激后,Tu686細胞細胞遷移及侵襲潛能較對照組明顯增強；⑤Smad2 siRNA干擾后,Tu686細胞上皮性標志物E-cadherin表達增強,細胞侵襲潛能降低。
　　 結(jié)論：⑴TGF-β1對頭頸鱗癌細胞Tu686生長增殖無顯著影響；⑵TGF-β1能誘導頭頸鱗癌細胞株Tu686發(fā)生EMT改變,并同時