出生后早期接觸狄氏劑對小鼠神經(jīng)發(fā)育毒性研究.pdf

1、1.研究背景:
　　 狄氏劑（dieldrin）是上世紀中葉發(fā)展起來的一種有機氯殺蟲劑。最早是由美國Julius Hyman &Company于1946年在實驗室中合成，并于1950年作為殺蟲劑推廣使用，具有神經(jīng)毒性。Richardson JR等研究表明，孕期母鼠經(jīng)口接觸較低劑量的狄氏劑（3mg/kg，經(jīng)口LD50為65mg/kg），能夠損害子代鼠黑質(zhì)紋狀體多巴胺能系統(tǒng)，并且增加子鼠成年后對其它神經(jīng)毒劑（如，MPTP）的易感性。

2、Hatcher JM等[3]對出生后9周（PND63）雄性小鼠腹腔注射低劑量狄氏劑（3mg/kg，1mg/kg，0.3mg/kg），能夠引起小鼠黑質(zhì)紋狀體多巴胺能系統(tǒng)的損害。而對出生后早期接觸低劑量狄氏劑的神經(jīng)發(fā)育毒性方面研究甚少。
　　 2.研究目的:觀察出生后早期狄氏劑染毒對ICR小鼠青春期和成年期神經(jīng)行為發(fā)育的影響，為探明狄氏劑的神經(jīng)發(fā)育毒性提供線索；通過檢測黑質(zhì)紋狀體膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）的表達，來探討其可能的機制

3、。
　　 3.實驗方案:仔鼠于出生后第三天（PND3）開始染毒，隔天一次，共染毒六次（PND3－13）。觀察仔鼠一般生理發(fā)育情況，并在哺乳期（～PND21）、青春期（～PND58）和成年期（～PND96）進行成組的神經(jīng)行為學功能測試，包括：洞板實驗、曠場試驗和自主活動箱實驗評價小鼠自主活動能力；平衡木實驗和抓繩實驗評價小鼠感覺運動能力；曠場試驗和黑白巷實驗評價小鼠評價小鼠的焦慮情緒；Morris水迷宮實驗評價小鼠空間學習記憶能力

4、。
　　 分別于PND36和PND98剖殺一批動物，分離黑質(zhì)紋狀體，用Western blot檢測黑質(zhì)紋狀體膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）的表達情況，探討狄氏劑神經(jīng)發(fā)育毒性的可能機制。
　　 4.結(jié)果:
　　 仔鼠出生后早期接觸不同劑量狄氏劑（20μg/kg，2μg/kg，0.2μg/kg），沒有引起其體重、一般軀體狀況（如，毛色光潔度、活力、步態(tài)、分泌物、眼外觀、神態(tài)等）和一般生理發(fā)育指標（如，耳廓分離、開眼、牙

5、萌出、全身絨毛等）的改變，表明本研究所選用劑量不會對仔鼠產(chǎn)生明顯毒性，其它結(jié)果發(fā)現(xiàn)：
　　 （1）狄氏劑染毒影響小鼠生殖系統(tǒng)的發(fā)育，與對照組相比，睪丸下降時間延遲（F=5.142，r=0.531，P<0.05），同時陰道開口時間提前（F=3.888，r=－0.466，P<0.05）；斷乳前神經(jīng)行為發(fā)育除負趨地性達標時間延遲外，其余行為學指標在各組間均無差異；
　　 （2）青春期和成年期的洞板實驗、自主活動箱實驗、平衡木實

6、驗、抓繩實驗、黑白巷實驗和曠場實驗中各指標在同期各組間差異均無統(tǒng)計學意義；
　　 （3）Morris水迷宮定位航行實驗中的登臺潛伏期和空間探索實驗中的游泳總路程在各組小鼠之間無統(tǒng)計學差異；青春期Morris水迷宮空間探索實驗中，定位航行結(jié)束后和次日的兩次穿越平臺位置次數(shù)與對照組相比，沒有統(tǒng)計學差異；而成年期Morris水迷宮空間探索實驗中，定位航行結(jié)束后和次日的兩次穿越平臺位置次數(shù)與對照組相比，高劑量組在60s內(nèi)穿越平臺次數(shù)均減

7、少（P<0.05）；
　　 （4）Western blotting檢測發(fā)現(xiàn)：早期接觸狄氏劑可造成青春期和成年期小鼠黑質(zhì)紋狀體GFAP蛋白表達增高（p<0.05），且這種改變有隨年齡增長而加重的趨勢。
　　 5.結(jié)論:
　　 出生后早期有限次數(shù)接觸狄氏劑在染毒期間會影響仔鼠軀體感覺運動功能發(fā)育，至青年期得以恢復；出生后早期接觸狄氏劑，會對青春期和成年期小鼠空間記憶能力產(chǎn)生明顯影響；出生后早期接觸狄氏劑會引起青春期黑