胡麻轉錄因子ABI3的克隆及功能分析.pdf

1、胡麻是我國主要油料作物之一，是我國工業(yè)用干性植物油和產區(qū)群眾主要食用油的來源。胡麻籽具有重要的經濟價值和營養(yǎng)價值。近年來由于人們生活水平得到不斷提高，胡麻油由于其優(yōu)良的品質被人們所逐漸熟知，相關的基礎研究也在逐步開展中。轉錄因子ABI3(abscisic acid-insensitive3)是含有植物特有的B3結構域的轉錄因子，參與種子的發(fā)育、休眠，并且是ABA信號途徑的中心調控因子，另外也參與了脂肪酸的代謝。本研究主要以胡麻張亞2號為

2、材料，研究了ABI3在胡麻基因組中的分布及相關功能分析，主要結果如下:
　　1.在張亞2號中成功克隆了轉錄因子ABI3的基因組序列和CDS序列，通過測序發(fā)現(xiàn)胡麻ABI3有三個轉錄本。
　　2.在張亞2號的不同組織和不用時期的蒴果中對ABI3的三個不同轉錄本進行內源表達的分析，結果顯示三個轉錄本在不同組織部位均有表達，并且三個轉錄本在蒴果的成熟過程中所扮演的角色有所差別。
　　3.分別構建了針對3個轉錄本的亞細胞定位載體

3、，亞細胞定位結果顯示LuABI3-W1，LuABI3-W2定位在細胞核，而LuABI3-W3無定位信號，說明LuABI3-W3無功能。
　　4.分別構建針對3個轉錄本的表達載體并轉化擬南芥植株。T2代轉基因植株表型實驗結果表明在ABA信號途徑中LuABI3-W1和LuABI3-W2兩個轉錄本響應植物激素ABA，并且促進種子的萌發(fā)，而LuABI3-W3不響應植物激素ABA。這些研究結果表明LuABI3-W1和LuABI3-W2兩個轉

4、錄本參與ABA信號途徑，并且在外施ABA時減少種子的休眠促進萌發(fā)。
　　5.生物信息學分析表明3個轉錄本由兩個胡麻基因轉錄而來。因此本實驗進一步克隆了張亞2號基因組中兩個啟動子并分別構建promoter: GUS載體轉化擬南芥。T1代擬南芥植株GUS染色檢測結果顯示啟動子ProLuABI3-W1和啟動子ProLuABI3-W2/3具有活性，并且在地上部分表達。
　　6.本實驗進一步研究了植物激素ABA對LuABI3-W1，L