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1、目的: 研究新型有序納米介孔生物活性玻璃的體外生物活性及其生物相容性。我們通過(guò)與復(fù)旦大學(xué)化學(xué)系無(wú)機(jī)材料合成實(shí)驗(yàn)室多孔材料課題組、上海市放射研究所骨代謝實(shí)驗(yàn)室合作,對(duì)新型有序納米介孔生物活性玻璃進(jìn)行生物學(xué)評(píng)價(jià)。 實(shí)施方法:通過(guò)以下方法進(jìn)行研究 一.新型有序納米介孔生物活性玻璃在模擬體液中的表面生物活性研究方法: 以Novabone為對(duì)照,利用模擬人體體液體外浸泡實(shí)驗(yàn)(SBF)的方法和掃描電鏡(SEM)、等離
2、子發(fā)射光譜儀(ICP)、pH儀等技術(shù),比較MBG與Novabone體外生成類(lèi)似于天然骨中無(wú)機(jī)礦物的羥基磷灰石(HA)的能力,同時(shí)分析SBF中各離子濃度、pH值的變化情況。 結(jié)果: MBG在SBF中浸泡4h表面即有羥基磷灰石(HA)生成,浸泡1~4hSBF中Ca、P、Si的離子濃度迅速達(dá)到峰值,8h后逐漸降低直至穩(wěn)定,洲僅在7.40~7.65范圍內(nèi)變化。 結(jié)論: MBG的體外生物活性更高,對(duì)體液微環(huán)境的影響
3、更輕微,作為骨組織修復(fù)替代材料或骨組織工程支架材料具有較高的研究和應(yīng)用價(jià)值。 二.新型有序納米介孔生物活性玻璃與成骨細(xì)胞體外復(fù)合培養(yǎng)的生物學(xué)評(píng)價(jià) 方法: 1.用大鼠成骨細(xì)胞與MBG浸提培養(yǎng)液、Novabone浸提培養(yǎng)液和正常的空白培養(yǎng)液培養(yǎng),分別于3、4、5d用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況:用四唑鹽(MTT)比色法計(jì)數(shù)計(jì)算細(xì)胞相對(duì)增殖度,用6級(jí)毒性分類(lèi)法評(píng)級(jí);用偶氮偶聯(lián)法(PNPP)染色,計(jì)算平行孔成骨細(xì)胞堿性磷酸
4、酶(ALP)活性。 2.采用大鼠成骨細(xì)胞體外培養(yǎng),按細(xì)胞增殖度法,取O.25%、O.5%、1%、2%、4%共五種濃度的MBG浸提培養(yǎng)液進(jìn)行檢測(cè),分別于3、4、5d用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況;用四唑鹽(M開(kāi))比色法計(jì)數(shù)計(jì)算細(xì)胞相對(duì)增殖度,用6級(jí)毒性分類(lèi)法評(píng)級(jí);用偶氮偶聯(lián)法(PNPP)染色,計(jì)算平行孔成骨細(xì)胞堿性磷酸酶(ALP)活性。 結(jié)果: MBG毒性評(píng)級(jí)為O~1級(jí),MBG浸提液在高濃度時(shí)輕度抑制細(xì)胞增殖,促進(jìn)細(xì)
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