高脂飲食下細(xì)胞凋亡通路激活對(duì)大鼠胰島β細(xì)胞功能的影響.pdf

1、目的： 本研究基于脂毒性的概念，采用長期高脂喂養(yǎng)正常SD大鼠產(chǎn)生胰島素抵抗和高游離脂肪酸血癥，制備出一種研究脂毒性的理想載體。檢測各實(shí)驗(yàn)組大鼠胰島β細(xì)胞凋亡情況及凋亡相關(guān)蛋白(Bcl-2、Fas、FasL、Caspase-3)的表達(dá)情況，并檢測大鼠血脂、血糖、胰島素等糖代謝相關(guān)指標(biāo)，然后綜合分析，旨在探討脂毒性引起胰島β細(xì)胞凋亡的可能作用機(jī)理，及其在胰島β細(xì)胞功能異常中的作用，進(jìn)而了解其與T2DM發(fā)病的關(guān)系。 方法：

2、 1．長期高脂喂養(yǎng)誘導(dǎo)正常的SD大鼠產(chǎn)生胰島素抵抗和脂代謝紊亂，制備研究脂毒性的理想載體。 2．將健康清潔級(jí)近交系SD雄性大鼠24只，按隨機(jī)數(shù)字法分為2組，每組12只。NC組為正常飼料喂養(yǎng)組；HF組為單純高脂喂養(yǎng)組；各組大鼠在適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，用相應(yīng)的飼料喂養(yǎng)20周。 3．從高脂喂養(yǎng)后的第1月起每月測體重，取大鼠血清測甘油三酯、膽固醇、空腹游離脂肪酸、空腹血糖、空腹胰島素，分析各指標(biāo)的相互關(guān)系。 4．實(shí)驗(yàn)結(jié)束

3、時(shí)處死大鼠，取出各組大鼠胰腺組織，分別用HE染色和透射電鏡觀察胰腺病理改變，TUNEI，法＋免疫組織化學(xué)SP法檢測各實(shí)驗(yàn)組大鼠胰島β細(xì)胞凋亡情況及凋亡相關(guān)蛋白(Bcl-2、Fas、FasL、Caspase-3)的表達(dá)情況。 結(jié)果： 1．與正常對(duì)照組相比，HF組高脂飼料喂養(yǎng)后大鼠體重、內(nèi)臟脂肪含量、體脂比、胰島素、血脂均明顯升高。 2．高脂喂養(yǎng)后的第一個(gè)月即出現(xiàn)高胰島素血癥，胰島素敏感指數(shù)降低，與 NC組比較，差異

4、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 3．NC、HF組血糖始終在正常范圍，但第20周末HF組大鼠血糖高于NC組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 4．HF組胰島β細(xì)胞凋亡率明顯高于NC組，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 5．NC組胰島中Bcl-2、Fas、FasL和Caspase-3表達(dá)較少或不表達(dá)，而在HF組胰島β細(xì)胞中表達(dá)均增多，與NC組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 6．胰島素敏感指數(shù)與大鼠體重、脂肪含量

5、、胰島素、TG、FFA 呈負(fù)相關(guān)。 7．胰島β細(xì)胞凋亡率與血糖、FFA、TG 水平之間呈正相關(guān)性。 8．胰島β細(xì)胞凋亡率與凋亡相關(guān)蛋白 Fas、FasL 和 Caspase-3 呈正相關(guān)。 結(jié)論 1．長期高脂肪飼料喂養(yǎng)正常SD大鼠可引起胰島素抵抗和脂質(zhì)代謝紊亂。 2．高脂飲食造成的胰島素抵抗與脂代謝紊亂有關(guān)。 3．高脂飼料喂養(yǎng)組大鼠胰島 Bcl-2、Fas、FasL和Caspase-3表達(dá)