蛋白酶體抑制劑乳孢素對(duì)腸缺血再灌注肝損傷保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的：小腸缺血再灌注(intestine ischemia reperfusion，IIR)除發(fā)生于腸道及其系膜血管自身疾病外，還可繼發(fā)于多種臨床疾病的病理生理過程中，引起全身系統(tǒng)性損傷，而肝臟則是缺血再灌注的最直接器官。本課題旨在研究IIR后肝損傷機(jī)制及蛋白酶體抑制劑乳孢素對(duì)IIR．肝損傷的保護(hù)作用，并在分子水平為乳孢素的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：將32只健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為4組：(1)假手術(shù)組(陰性對(duì)照組)

2、：(2)腸缺血再灌注組(I/R組)：(3)低劑量乳孢素預(yù)處理組(0.2mg/kg)；(4)高劑量乳孢素預(yù)處理組(0.6mg/kg)。I/R．組及乳孢素預(yù)處理組用無創(chuàng)小血管夾夾閉腸系膜上的動(dòng)脈(superior mesentericartery，SMA)1h，再灌注4h，建立腸缺血再灌注損傷模型；乳孢素預(yù)處理組術(shù)前1h腹腔內(nèi)注射乳孢素：陰性對(duì)照組僅進(jìn)行剖腹術(shù)及SMA分離術(shù)。再灌注結(jié)束，取血，肝和腸組織。檢測(cè)：(1)肝、腸損傷指標(biāo)：肝ALT

3、、AST和LDH水平的測(cè)定，光鏡下觀察小腸和肝組織學(xué)改變；(2)20s蛋白酶體活性；(3)中性粒細(xì)胞激活相關(guān)指標(biāo)：肝組織髓過氧化酶(myeloperoxidase，MPO)活力及細(xì)胞間黏附分子-1(intercellular adhesionmdecule，ICAM-1)表達(dá)情況；(4)肝組織NF-кB的表達(dá)。 結(jié)果：1、與假手術(shù)組相比，I/R．組：(1)組織形態(tài)學(xué)見肝組織有明顯病理損傷，表現(xiàn)為肝組織水腫、出血和炎性粒細(xì)胞浸潤

4、。(2)肝功血清酶學(xué)檢測(cè)：AST、ALT和LDH均顯著升高(p<0.05，p<0.01，p<0.05)；提示肝功能嚴(yán)重受損。(3)肝組織MPO水平顯著升高(p<0.05)；20S蛋白酶體活性無明顯變化(p>0.05)。(4)免疫組織化學(xué)檢測(cè)：肝組織ICAM-1和NF-кB表達(dá)均顯著增強(qiáng)。2、采用乳孢素預(yù)處理后，與I/R組相比，0.6mg/kg乳孢素預(yù)處理組：(1)組織形態(tài)學(xué)見肝、腸損傷程度明顯減輕。(2)肝功能改善，表現(xiàn)為血清AST、A

5、LT和LDH水平顯著降低(p<0.05，p<0.05，p<0.05)。(3)肝、腸組織過氧化損傷及白細(xì)胞浸潤減輕，表現(xiàn)為肝臟MPO含量減少(p<0.05)；20S蛋白酶體活性降低(p<0.01)。(4)肝組織中ICAM-1和NF-кB表達(dá)減弱。結(jié)論：(1)小腸缺血再灌注可以導(dǎo)致嚴(yán)重的肝損傷；(2)腸缺血再灌注肝損傷機(jī)制復(fù)雜，其發(fā)生和發(fā)展與NF-кB激活有關(guān)；(3)乳孢素預(yù)處理對(duì)腸缺血再灌注導(dǎo)致的肝損傷有明顯的保護(hù)作用，且呈劑量依賴性；(