雌激素缺乏—膽固醇過載對β淀粉樣蛋白的影響.pdf

1、中山大學碩士學位論文雌激素缺乏—膽固醇過載對β淀粉樣蛋白的影響姓名：程冠杰申請學位級別：碩士專業(yè)：人體解剖與組織胚胎學指導(dǎo)教師：汪華僑20080602中山大學碩士學位論文 雌激素缺乏一膽固醇過載對D 淀粉樣蛋白的影響1 材料和方法1 ．1 實驗對象、來源及分組實驗用雌性S D 大鼠購自廣東省實驗動物中心，共4 0 只，觀察其初始精神狀態(tài)和活力均良好，體重( 1 8 0 士3 ．2 9 ) 。 隨機分為五組：對照組( C o n t r

2、0 1 ) ，去卵巢組( O v x ) ，高膽固醇組( H C h 0 1 ) ，模型組( O v x + H C h 0 1 ) ，植物雌激素治療組( O v x +H C h o l + E ) ，每組8 只。大鼠經(jīng)去卵巢手術(shù)后恢復(fù)1 ．2 周開始進食高膽固醇飼料。高膽固醇飼料配方：膽固醇2 ％+ 豬油1 0 ％+ 膽酸鈉0 ．3 ％+ 普通鼠料粉8 8 ．7 ％。植物雌激素治療組給藥：2 5 0 l ag 金雀異黃酮( 溶于5

3、0 u l 二甲基亞砜) ，腹部皮下注射，每隔2 d 注射1 次，注射1 8 周。1 ．2M o r r i s 水迷宮行為學測試飼喂1 6 周后，每組隨機選出5 只鼠，行M o r r i s 水迷宮試驗，以檢測行為學方面的變化。包括定位航行測試和空間探索測試。1 ．3 R T - P C R 檢測海馬A P P 、B A C E l 的m R N A 水平；夾心E L I S A 法檢測大鼠海馬腦勻漿的A [ 1 4 0 含量水迷宮

4、試驗后休息一周，各組隨機選取5 只大鼠處死取雙側(cè)海馬，一側(cè)用來提總R N A ，做半定量R T - P C R 檢測A P P 、B A C E l 的m R N A 水平，另一側(cè)加8 倍腦組織質(zhì)量的裂解液勻漿，勻漿液室溫靜置3 - 4 h 待其充分裂解后，加B S A T ．D P B S 稀釋后，在4 ℃下1 6 0 0 0 轉(zhuǎn)離心2 0 m i n ，取上清。各個上清液用考馬斯亮藍方法測總蛋白濃度，然后調(diào)整各個樣品上清的總蛋白濃度