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文檔簡介
1、目的:通過對耐青霉素肺炎鏈球菌的蛋白質(zhì)組學研究,從蛋白質(zhì)水平上闡述肺炎鏈球菌耐青霉素相關(guān)蛋白的種類及其功能,探索耐青霉素肺炎鏈球菌的機制。
方法:用肉湯稀釋法測定青霉素類抗菌藥物-苯唑西林(oxacillin)對肺炎鏈球菌國際標準菌株ATCC49619的最低抑菌濃度(MIC);采用次抑菌濃度誘導法體外人工誘導耐青霉素肺炎鏈球菌株;雙向電泳分離肺炎鏈球菌國際標準菌株和誘導耐藥株的全菌蛋白質(zhì);Image Master2D Plat
2、inum5.0軟件對電泳圖譜進行分析,尋找表達差異蛋白點;對差異蛋白點進行質(zhì)譜分析;初步分析差異蛋白點的功能。
結(jié)果:(1)成功誘導耐青霉素肺炎鏈球菌。肺炎鏈球菌標準菌株ATCC49619 MIC為0.06μg/m1,誘導耐藥后MIC為3.84μg/ml,依據(jù)美國臨床實驗室國家標準化委員會(NCCLS)關(guān)于肺炎鏈球菌對青霉素的MIC結(jié)果的判定為耐藥;(2)對肺炎鏈球菌的標準株和耐藥株的全菌蛋白進行差異蛋白的分析后,發(fā)現(xiàn)并鑒定了
3、差異蛋白點10個。
結(jié)論:(1)成功建立肺炎鏈球菌標準菌株和耐藥菌株的全菌蛋白雙向電泳圖譜,分別分離出約320,350個蛋白點;(2)差異蛋白分析:耐藥株較之標準株分子伴侶(chaperonin GroES)、脂蛋白(lipoprotein)、果糖二磷酸醛縮酶(fructose-bi sphosphate aldolase)、α-烯醇化酶(alpha-enolase)表達量下調(diào),ABC轉(zhuǎn)運器(ABC transporter)、
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