RUNX2基因突變對人牙囊細胞的生物學特性的研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學2 0 1 0 級碩士學位論文R U N X 2 基因突變對人牙囊細胞的生物學特性的研究E f f e c to f R 【刀、【) 【2m u t a t i o n o nc h a r a c t e r i z a t i o no fh u m a n d e n t a l f o l l i c l ec e l l si nv i t r o課題來源：廣東省醫(yī)學科學技術研究基金( 項目編號：A 2 0 1 2

2、 1 0 6 )國家自然科學基金( 項目編號：8 1 2 7 116 0 )學位申請人導師姓名專業(yè)培養(yǎng)培養(yǎng)所在名稱類型層次學院魏迪欣章錦才教授軒東英副教授口腔臨床醫(yī)學學術型碩士研究生廣東省口腔醫(yī)院·南方醫(yī)科大學附屬醫(yī)院2 013 年5 月 6 日 廣州中文摘要第一章顱骨鎖骨發(fā)育不良綜合癥患者的臨床資料收集和突變檢測目的：收集C C D 病例，獲取R U N X 2 基因突變患者牙囊組織，為后續(xù)實驗打下基礎。方法：對具有相關臨床

3、癥狀的先證者詳細采集病史，明確單發(fā)或家族聚集傾向；利用x 線檢查全面了解患者及其父母的全身骨骼發(fā)育情況；詳細進行口腔檢查，記錄恒牙萌出及乳牙遲萌以及埋藏牙、多生牙等典型臨床癥狀；綜合上述臨床資料，明確診斷。取C C D 患者及其姐姐的靜脈血，抽提基因組D N A ，l ％瓊脂糖電泳檢查抽取的D N A 質量，用核酸及蛋白定量儀對其進行定量，P C R擴增R U N X 2 的序列，純化P C R 產物，進行雙向直接測序，對R U N X

4、 2 基因測序結果進行核酸序列同源性比較分析( B l a s t n ) ，分析突變位點；結果：收集到一例C C D 患者，具有明顯的臨床特征，符合臨床診斷。R U N X 2基因測序結果核酸序列同源性比較分析( B l a s t n ) 發(fā)現(xiàn)在E x o n2 上發(fā)現(xiàn)插入T G堿基突變，突變型為C ．3 0 9 3 1 0 i n s T G ?；颊呓憬慵案改笩o明顯C C D 臨床表現(xiàn)，患者姐姐基因組D N A 未發(fā)現(xiàn)R U N

5、X 2 突變位點，為散發(fā)病例。結論：發(fā)現(xiàn)R U N X 2 基因C ．3 0 9 3 1 0 i n s T G 突變位點為該患者的致病基因突變位點，而且該位點為首次檢出的新的突變位點。第二章R U N X 吵／m 人牙囊細胞的分離培養(yǎng)和鑒定目的：建立攜帶R U N X 2 基因突變位點C ．3 0 9 —3 1 0 i n s T G 的人牙囊細胞體外培養(yǎng)體系R U N X Z ／m H D F C 。方法：選取C C D 患者埋伏恒