血清軟骨寡聚基質(zhì)蛋白在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者中的意義.pdf

1、目的:類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是一種致畸性系統(tǒng)性慢性炎癥性的自身免疫性疾病。RA最顯著的一個特點(diǎn)是外周關(guān)節(jié)的增生性和侵蝕性滑膜炎,并伴有關(guān)節(jié)軟骨骨質(zhì)的進(jìn)行性和不可逆性破壞。從組織形態(tài)上看,RA關(guān)節(jié)軟骨的破壞開始于滑膜與軟骨的交接處,此處滑膜增厚,血管及細(xì)胞成分顯著增多,形成血管翼,侵入軟骨,構(gòu)成血管翼/軟骨結(jié)合,造成軟骨及關(guān)節(jié)破壞,關(guān)節(jié)畸形及功能障礙。據(jù)文獻(xiàn)報道,RA發(fā)病2年內(nèi)。即可出現(xiàn)不可逆的關(guān)節(jié)

2、實質(zhì)性破壞,是造成我國人群喪失勞動力致殘的主要因為之一。目前RA的診斷和分期主要根據(jù)患者的臨床癥狀、體征、影像學(xué)結(jié)果及一些傳統(tǒng)實驗室檢查。這些方法常滯后于病變的發(fā)展,雖然在疾病中晚期診斷的敏感性和準(zhǔn)確性較高,但在疾病早期難以確診或鑒別。若能在出現(xiàn)形態(tài)學(xué)改變以前就在生化代謝方面進(jìn)行早期診斷,從而能在病變不可逆發(fā)展之前及早防治,就可以逆轉(zhuǎn)或延緩病變進(jìn)展,預(yù)防關(guān)節(jié)變形、致殘,同時也可以對RA骨破壞的預(yù)后進(jìn)行評估。
　　 血清軟骨寡聚基

3、質(zhì)蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)是新近發(fā)現(xiàn)的軟骨代謝標(biāo)志物,是能反映骨與軟骨破壞的一種敏感性的血清學(xué)標(biāo)記。最早于1992年由瑞典LUND大學(xué)Dick Heine-gard教授首先描述,COMP是細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的一種,屬于凝血栓蛋白家族。COMP最初是從軟骨組織中分離出來的,近年來更多研究表明在所有類型的軟骨、眼球玻璃體、肌腱及血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)都有COMP的表達(dá)。盡管COMP由關(guān)節(jié)

4、軟骨細(xì)胞合成,但其合成過程并不僅僅局限于已分化成熟的軟骨細(xì)胞；從類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病人提取的滑膜組織中也發(fā)現(xiàn)了COMP。而且在相同的體外培養(yǎng)條件下,滑膜細(xì)胞可以產(chǎn)生多于軟骨細(xì)胞9倍的COMP。與其他分子標(biāo)記物相比,COMP可以更為可靠地提示關(guān)節(jié)炎癥的發(fā)生,由此推測,COMP的合成與降解可能與滑膜的炎性病理變化密切相關(guān)。
　　 本課題通過酶聯(lián)免疫吸附實驗(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)定量

5、檢測RA患者及健康人血清中COMP含量并分析其與病情活動及關(guān)節(jié)破壞的關(guān)系,期待為RA骨破壞的早期發(fā)現(xiàn)早期治療及判斷預(yù)后提供新的思路。
　　 方法:(1)用真空采血管分別抽取健康體檢者(即正常對照組,20例)和RA患者(實驗組,60例)靜脈血3ml,60例RA患者中30例為活動期患者,30例為緩解期患者。血清離體后室溫放置2小時,1000r/min離心20分鐘,取上層血清分裝于1.5ml的Eppendorf管中。標(biāo)本放入-70℃低

6、溫冰箱中保存?zhèn)溆谩?2)應(yīng)剛ELISA方法檢測血清COMP和抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(抗CCP抗體)水平。嚴(yán)格按照說明書操作。(3)記錄患者的年齡、病程、晨僵時間、關(guān)節(jié)壓痛指數(shù)、關(guān)節(jié)腫脹指數(shù)、關(guān)節(jié)活動痛指數(shù)、關(guān)節(jié)休息痛指數(shù)、血沉(Erythrocyte Sedimentation RAte,ESR)、C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,CRP)、血小板(blood platelet,PLT)、類風(fēng)濕因子(Rheumatoid F

7、actor,RF)以及雙手X線。(4)測量所有數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理,計量資料以均數(shù)±-標(biāo)準(zhǔn)差((x)±S)表示,組間比較采用兩個獨(dú)立樣本的t檢驗。病例組年齡、病程、晨僵時間、ESR、抗CCP抗體和CRP與COMP的關(guān)系采用Pearson相關(guān)分析,檢驗差異的顯著性用P值表示,P<0.05表示差異顯著,有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1 RA組一般情況和各項實驗室指標(biāo):60例RA患者中,10例男性RA患

8、者血清COMP水平是(26.00±9.35)ng/ml,50例女性RA患者血清COMP水平是(28.63±8.79)ng/ml；年齡(49.62±10.43)歲；病程(4.31±6.11)年；晨僵時間(1.84±1.95)小時；關(guān)節(jié)壓痛指數(shù)(15.43±24.49)；關(guān)節(jié)腫脹指數(shù)(14.18±17.19.)；關(guān)節(jié)活動痛指數(shù)(19.25±25.24)；關(guān)節(jié)休息痛指數(shù)(3.55±10.40)；COMP(28.19±8.86)ng/ml； R

9、F(433.66±659.76)U/ml；ESR(46.62±31.36)mm/l h；CRP(4.47±6.55)mg/dl；PLT(364.47±131.95)*109/L；抗CCP抗體(123.40±94.48)RU/ml。
　　 2 RA組60例與正常對照組20例血清COMP水平的比較:RA組血清COMP水平為(28.19±8.86)ng/ml,正常對照組血清COMP水平為(23.42±5.34)ng/ml,兩組間差異有

10、統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.006),表明RA組血清COMP水平明顯高于正常對照組。
　　 3 RA活動組患者30例與緩解組患者30例血清COMP水平比較:活動組血清COMP水平為(31.86±8.61)ng/ml,緩解組血清COMP為(24.51±7.59)ng/ml,兩組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.001),表明RA活動組患者血清COMP水平明顯高于RA緩解組患者。
　　 4 RA患者中10例男性和50例女性血清COMP

11、水平比較:10例男性RA患者血清COMP水平為(26.00±9.35)ng/ml,50例女性RA患者血清COMP水平為(28.63±8.79)ng/ml,兩組間比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.429),表明男性與女性RA患者間血清COMP水平無明顯差異。
　　 5 RA緩解組患者30例與正常對照組患者20例血清COMP水平比較:正常對照組血清COMP水平為(23.42±5.34)ng/ml,緩解組血清COMP水平為(24.51±7.5

12、9)ng/ml,兩組比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.578),表明RA緩解組患者與正常對照組間血清COMP水平無明顯差異。
　　 633例出現(xiàn)關(guān)節(jié)骨質(zhì)損害(雙手X線分期達(dá)到Ⅱ期或Ⅱ期以上)的RA患者血清COMP水平為(31.05±8.94)ng/ml,27例無關(guān)節(jié)骨質(zhì)損害(雙手X線分期I期)的RA患者血清COMP水平為(24.68±7.53)ng/ml:兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.005),出現(xiàn)關(guān)節(jié)骨質(zhì)損害的RA患者血清COMP水

13、平明顯高于無關(guān)節(jié)骨質(zhì)損害的RA患者。
　　 7血清COMP水平和RA患者的關(guān)節(jié)壓痛指數(shù)、關(guān)節(jié)腫脹指數(shù)、關(guān)節(jié)活動痛指數(shù)、關(guān)節(jié)休息痛指數(shù)、晨僵時間、ESR、CRP及PLT呈正相關(guān)(P<0.05),與年齡、病程、抗CCP抗體及RF無明顯關(guān)系(P>0.05)。
　　 結(jié)論:(1)RA患者血清中COMP水平增高。(2)血清COMP水平與.RA疾病活動性呈正相關(guān),血清中COMP水平增高提示RA患者處于活動期。(3)血清COMP水平增