洛貝林逆轉(zhuǎn)結(jié)腸癌細胞株HCT-8-VCR多藥耐藥的實驗研究.pdf

1、背景與目的：化療是惡性腫瘤的主要治療手段之一，腫瘤細胞對化療藥物的多藥耐藥性（multidrug resistance，MDR）是化療失敗的主要原因，占化療失敗的90％以上。因此，MDR的逆轉(zhuǎn)有著重要的意義和臨床應(yīng)用價值。生物堿類的天然有效成分被證明具有逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥的作用。洛貝林（Lobeline），是一種哌啶類生物堿，能選擇性地興奮頸動脈體化學(xué)感受器，反射地興奮呼吸中樞，大劑量也能直接興奮呼吸中樞。國外有學(xué)者通過研究證明洛貝林能抑

2、制P-gp的活性，洛貝林的MDR逆轉(zhuǎn)可能性能在阿霉素化療的細胞中得到證明，洛貝林能增加耐藥腫瘤細胞的化療敏感性。本實驗的目的在于探討洛貝林逆轉(zhuǎn)多藥耐藥的機制，并與已知的具有逆轉(zhuǎn)P-gp介導(dǎo)的MDR的藥物維拉帕米比較，評估其有效性。 方法：以人結(jié)腸癌細胞株HCT-8/VCR為研究對象，用四氮唑藍（MTT）法測定不同濃度的長春新堿和5-氟尿嘧啶對細胞的抑制率及在洛貝林干預(yù)下二者對細胞的抑制率，由此求取耐藥逆轉(zhuǎn)的倍數(shù)；用微孔板熒光分光

3、光度計測定在無干預(yù)措施、不同濃度的洛貝林干預(yù)下HCT-8/VCR細胞內(nèi)羅丹明123的熒光強度；用流式細胞術(shù)測定在無干預(yù)措施、洛貝林20μM、維拉帕米20μM干預(yù)下HCT-8/VCR細胞內(nèi)羅丹明123的積聚濃度。統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS13.0軟件進行分析。 結(jié)果：通過MTT法求得上述實驗條件下細胞生長抑制率，表明不同濃度的長春新堿和5-氟尿嘧啶對HCT-8/VCR細胞株具有抑制作用，其抑制作用與濃度呈正相關(guān)；加洛貝林干預(yù)后，HCT

4、-8/VCR細胞株對長春新堿和5-氟尿嘧啶的敏感性增加；羅丹明123排出實驗示經(jīng)洛貝林處理的HCT-8/VCR細胞內(nèi)羅丹明123的熒光強度高于未經(jīng)處理的細胞內(nèi)熒光強度，且細胞內(nèi)羅丹明123的熒光強度與洛貝林的濃度呈正相關(guān)；流式細胞術(shù)顯示，20μM洛貝林的逆轉(zhuǎn)MDR的有效率是20μM維拉帕米有效率的68％。 結(jié)論：洛貝林可以逆轉(zhuǎn)人結(jié)腸癌多藥耐藥細胞株HCT-8/VCR對VCR和5-FU的耐藥性。洛貝林可以增加人結(jié)腸癌多藥耐藥細胞株