孕酮水平對小鼠子宮內(nèi)膜蛻膜化的影響及其形態(tài)計(jì)算機(jī)三維重組.pdf

1、子宮是親代與后代個體之間生命延續(xù)的器官，作為一個生命孕育和最初生長的器官有著它一定的特性，例如月經(jīng)的發(fā)生、與受精卵生長相適應(yīng)的一系列變化等。子宮內(nèi)膜的周期性變化主要由于垂體-卵巢軸的激素變化產(chǎn)生。隨著卵泡的成熟、排卵，體內(nèi)的雌、孕激素也發(fā)生著周期性的波動，雌、孕激素周期性的波動是月經(jīng)現(xiàn)象產(chǎn)生的直接原因。
　　 由此可以看出，子宮是激素敏感器官，因此激素的不穩(wěn)定就會使子宮產(chǎn)生異常的變化。在臨床上，子宮內(nèi)膜的異常出血是困擾婦產(chǎn)科臨床

2、和計(jì)劃生育實(shí)踐的重要臨床現(xiàn)象。子宮內(nèi)膜的異常出血是相對于正常的周期性出血而言的，因此，闡明一般周期性出血的成因?qū)ρ芯孔訉m內(nèi)膜異常出血也具有一定意義。
　　 孕酮是雌性動物體內(nèi)非常重要的性腺類固醇激素。既往的研究指出[1]，孕酮是導(dǎo)致子宮周期性出血的重要因素。在整個月經(jīng)周期中，多種激素發(fā)生波動，但孕酮的下降是導(dǎo)致子宮內(nèi)膜蛻膜組織壞死崩解并出血的關(guān)鍵因素。既往實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)主要是在模擬月經(jīng)周期的激素水平波動[1-3]，在實(shí)驗(yàn)的最終都會發(fā)生

3、孕酮的撤退。但根據(jù)臨床報(bào)告[4]，大多數(shù)不規(guī)律出血的患者其體內(nèi)孕酮水平并沒有降低到月經(jīng)周期分泌晚期的撤退水平，因此我們嘗試在孕酮維持的狀態(tài)下觀察小鼠子宮內(nèi)膜蛻膜的變化，這對于進(jìn)一步闡明孕酮對于出血的影響有重要的意義。
　　 本實(shí)驗(yàn)用孕酮皮埋管維持小鼠體內(nèi)的孕酮水平。首先確定皮埋管長度與所維持小鼠體內(nèi)孕酮水平之間的關(guān)系。經(jīng)測定，1cm長孕酮皮埋管所維持激素水平與小鼠妊娠第5天體內(nèi)激素水平相當(dāng)。所維持孕酮水平隨皮埋管有效長度增長而升

4、高，且存在較好的線性關(guān)系。這為我們后期就孕酮維持小鼠模型的建立做好準(zhǔn)備。
　　 在小鼠月經(jīng)模型的基礎(chǔ)上，建立小鼠人工誘導(dǎo)蛻膜化孕酮水平維持模型。此模型與文獻(xiàn)報(bào)告的三個模型[1-3]的區(qū)別在于在小鼠蛻膜化模型的基礎(chǔ)上維持孕酮水平，繼而觀察蛻膜的變化。我們根據(jù)文獻(xiàn)所報(bào)告的方法[5]，通過調(diào)節(jié)皮埋管長度使小鼠體內(nèi)孕酮水平在實(shí)驗(yàn)觀察階段恒定于某一水平并連續(xù)監(jiān)測陰道出血，觀察孕酮水平與出血、出血時間的關(guān)系以及崩解后小鼠子宮內(nèi)膜蛻膜組織的變

5、化。結(jié)果提示，連續(xù)觀察的120-248小時過程中，小鼠子宮內(nèi)膜在維持孕酮的條件下仍然陸續(xù)發(fā)生了出血，組織切片顯示各組普遍出現(xiàn)了蛻膜壞死和崩解，出血時間隨孕酮水平的升高而延遲。
　　 隨后我們觀察了當(dāng)孕酮水平維持在小鼠妊娠第5天水平下誘導(dǎo)蛻膜化后，不同時間的變化。我們分別觀察了誘導(dǎo)蛻膜化后96、120、144小時的變化。隨著觀察時間的延長，組織壞死程度逐漸加深。在誘導(dǎo)后96小時，大體觀察組織可看到蛻膜化區(qū)域呈結(jié)節(jié)樣。切片觀察可發(fā)現(xiàn)

6、在宮腔中央有一空泡，蛻膜化組織中充滿大量擴(kuò)張血管。在誘導(dǎo)后144小時，壞死組織滯留于宮腔中且宮腔上皮未發(fā)生修復(fù)。實(shí)驗(yàn)中沒有胚胎，僅通過宮腔注油給予宮腔上皮著床刺激，所觀察到的變化為單純的母體的變化。這些變化與妊娠子宮部分結(jié)構(gòu)和變化相似。提示在妊娠過程中的一些變化與胚胎無關(guān)。
　　 在孕酮水平維持的過程中我們發(fā)現(xiàn)如果孕酮水平維持且蛻膜組織沒有崩解時，子宮內(nèi)膜中就會出現(xiàn)一些特殊的組織形態(tài)。在宮腔的中間會出現(xiàn)一個閉合的腔、閉合空腔周圍

7、空腔，以及幾乎充滿整個子宮的血竇。我們想獲得這三種結(jié)構(gòu)的空間構(gòu)象。通過對組織連續(xù)切片并對其染色照相獲得了在每個斷層中三種結(jié)構(gòu)的形態(tài)，后通過Adobe Photoshop以及Mimics軟件對切片圖像進(jìn)行處理并進(jìn)行三維重組，最終獲得了三種結(jié)構(gòu)空間構(gòu)型及其相互空間關(guān)系，這對于闡明血管及其他結(jié)構(gòu)在月經(jīng)及妊娠過程中的作用提供了有價(jià)值的信息，也對形態(tài)學(xué)研究提供了一種新手段。
　　 本實(shí)驗(yàn)從組織形態(tài)學(xué)觀察到最后的方法學(xué)研究都有一定的創(chuàng)新性，