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1、上海第二醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文槲皮素干預(yù)K562A02細胞多藥耐藥基因及HSP70表達的研究姓名:矯強申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):血液病學(xué)指導(dǎo)教師:歐陽仁榮趙勁秋2002.5.1上海第二醫(yī)科大學(xué)碩士論文第一部分槲皮素對K562/A02細胞多藥耐藥基因及P糖蛋白表達的影響ff方法用終濃度為o5umol/L、1umol/L、5pmol/L、10umol/L、50um01/L、100um01/L的槲皮素處理K562/A02細胞,24小時后,用RT—
2、PCR方法檢測mdrl基因表達,流式細胞儀檢測Pgp含量變化。結(jié)果10umol/L以下濃度處理組mdrl基因表達與空白對照無顯著差異,50lamol/L、100umol/L濃度處理組mdrl基因表達較空白對照相比明顯下調(diào)。流式細胞儀檢測Pgp:陰性對照(K562敏感株)幾乎沒有熒光標記:不加槲皮素的K562/A02細胞,熒光標記顯示強陽性:經(jīng)05—1ooumol/l槲皮素處理的K562/A02細胞,熒光標記顯示部分陽性,且有隨濃度增加而
3、減弱的趨勢。夕’、r強冤結(jié)論:(1)較高濃度的槲皮素可下調(diào)K562/A02細胞mdrl基因的表達。(2)槲皮素可下調(diào)K562/A02細胞Pgp的表達。第二部分槲皮素對K562A/02細胞株70KD熱休克蛋白mRNA及蛋白質(zhì)表達的影響廠f方法分別于熱處理前后在培養(yǎng)液中加入終濃度為10umol/L的槲\皮素,并設(shè)對照組,于熱處理后即刻、2、4、6小時收集樣品,用RT~PCR方法檢測HSP70基因表達,Westernblot方法檢測HSP70
4、蛋白表達。結(jié)果熱休克處理明顯增加K562/A02細胞HSP70基因轉(zhuǎn)錄和蛋白表達;熱處理前在培養(yǎng)液中加入終濃度為10umol/L的槲皮素,HSP70基因及蛋白表達較單純熱處理組均有顯著下調(diào);熱處理后在培養(yǎng)液中加入終濃度為1011mol/L的槲皮素,HSP70基因及蛋白表達較單純熱處理組無明顯變化。)—//結(jié)論(1)熱休克處理明顯增加K562/A02細胞HSP70基因轉(zhuǎn)錄和蛋白表達。(2)槲皮素能夠抑制K562/A02細胞HSP70基因及
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