硫酸酯化多糖體外抗HIV-1和其它性病病原體活性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、艾滋病是目前世界上最危險(xiǎn)的傳染性疾病之一，主要通過性行為、血液和母嬰傳播。雖然現(xiàn)在HIV疫苗的研制還在進(jìn)行中，但藥物抗HIV已取得一定的成果。如高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法(HAART)。由于HIV具有高度的復(fù)雜性和變異性，容易出現(xiàn)抗藥性。且藥物治療HIV存在藥物副作用大、費(fèi)用昂貴和無法徹底清除病毒等問題，因此我們面臨最大的挑戰(zhàn)不僅僅是保證抗病毒藥物的療效，更重要的是怎樣有效的預(yù)防HIV的感染。殺微生物劑(Microbicides)是指性生活前

2、應(yīng)用于陰道、宮頸或者直腸內(nèi)，能夠直接殺滅或使HIV-1等病毒和細(xì)菌類病原體失活的、人工合成的或天然的物質(zhì)。目前全世界還沒有一種殺微生物劑上市，2006年報(bào)道的進(jìn)入臨床和正在研制中的殺微生物劑共有62種，有5種進(jìn)入臨床Ⅲ期試驗(yàn)，4種進(jìn)入Ⅱ期試驗(yàn)，有超過20種的候選物進(jìn)入了臨床Ⅰ期研究。 本課題采用了合胞體形成抑制實(shí)驗(yàn)法、MTT比色法和時(shí)間過程及預(yù)作用方法，對(duì)幾種硫酸多糖進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，待測(cè)樣品306A、306B、306G、K

3、1、F1、C1、SH1、Q4-1和LD相較其它待測(cè)樣品顯示出較好的抑制HIV-1ⅢB誘導(dǎo)C8166細(xì)胞形成合胞體的效果，其EC50值分別為0.10、0.47、0.54、0.75、0.23、0.16、0.08、0.22、0.21、6.23μg/ml。相較而言，306A、306B、306G、K1、F1、C1、SH1及Q4-1幾種待測(cè)化合物，其治療指數(shù)TI值分別為2123、1867、1333、3236、6512、14172、4545、6023

4、，其中Cl表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑制HIV-1ⅢB誘導(dǎo)C8166細(xì)胞形成合胞體的效果，其TI值超過了陽(yáng)性對(duì)照AZT。而化合物F1和Q4-1從抑制HIV-1ⅢB誘導(dǎo)C8166細(xì)胞形成合胞體的方面來看，其TI值已經(jīng)接近陽(yáng)性對(duì)照AZT的效果。除了對(duì)HIV-1ⅢB有抑制作用，待測(cè)化合物K1、306B、SH1和Q4-1對(duì)HSV-Ⅱ也有一定的抑制作用，其中，化合物K1對(duì)HSV-Ⅱ的EC50值達(dá)到85.69μg/ml，而化合物Q4-1、306B和SH1的EC5

5、0值分別為125.25、167.69和117.07μg/ml。同時(shí)，我們對(duì)待測(cè)化合物306A、306G、K1、C1、SH1、Q4-1及LD進(jìn)行了白色念珠菌抑制實(shí)驗(yàn)，但結(jié)果顯示，這些樣品對(duì)白色念珠菌并沒有明顯的抑制作用。 為了初步確定待測(cè)樣品在病毒復(fù)制周期中的作用位點(diǎn)，即待測(cè)化合物先與細(xì)胞作用后抑制了病毒與細(xì)胞的結(jié)合位點(diǎn)，還是待測(cè)化合物先與病毒作用，從而達(dá)到抑制作用。我們采用時(shí)間過程和樣品與病毒或細(xì)胞預(yù)作用實(shí)驗(yàn)方法，對(duì)硫酸多糖30

6、6A、Q4-1、LD、C1進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示，樣品LD和C1無論是與病毒或是與細(xì)胞先作用一定時(shí)間，均未表現(xiàn)出對(duì)HIV-1ⅢB有明顯的抑制作用。這提示，這兩種化合物對(duì)病毒的抑制作用的機(jī)制可能在其它環(huán)節(jié)。樣品Q4-1在與病毒預(yù)作用時(shí)有明顯的抑制作用，而與細(xì)胞預(yù)作用時(shí)未顯示出抑制效果，且時(shí)間過程實(shí)驗(yàn)說明Q4-1是作用在病毒吸附或融合階段。從這一點(diǎn)推測(cè)，Q4-1這一化合物可能是通過與病毒發(fā)生直接相互作用，而實(shí)現(xiàn)抑制效果。 綜上所述，在