急性肝衰大鼠血清I-FABP、MTL及GAS水平變化及其意義.pdf

1、目的：觀察急性肝衰竭(ALF)大鼠血清腸型脂肪酸蛋白(I-FABP)、胃動(dòng)素(MTL)胃泌素(GAS)水平變化，分析其與急性肝衰竭大鼠胃腸功能障礙之間的關(guān)系，從而為急性肝衰竭胃腸功能障礙的早期預(yù)測提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：清潔級(jí)健康雌性SD大鼠85只，隨機(jī)分成ALF模型組(n=50)，正常對(duì)照組(n=35)，適應(yīng)性喂養(yǎng)3天。ALF模型組大鼠采用TAA(生理鹽水配成40g/L)進(jìn)行腹腔注射，注射劑量為350mg/Kg，24h后

2、按原劑量重復(fù)腹腔注射一次，建立大鼠ALF模型；正常對(duì)照組同時(shí)間點(diǎn)腹腔注射同等量生理鹽水。分別于腹腔注射完成后24h、36h、48h取血測定各組大鼠肝功能指標(biāo)，包括ALT、AST、TBiL，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法測定各組大鼠血清I-FABP、MTL、GAS水平。同時(shí)取血完成后處死大鼠取右葉肝組織、胃竇及2cm近端十二指腸。經(jīng)40g/L甲醛緩沖液固定后，石蠟包埋、切片、HE染色，光鏡下觀察肝及小腸組織病理變化。用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)

3、行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料統(tǒng)計(jì)學(xué)描述采用-x±s，組間指標(biāo)差別檢驗(yàn)采用單因素方差分析，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析，統(tǒng)計(jì)學(xué)性確定為雙側(cè)檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有顯著性。
　　結(jié)果：
　　1.兩組大鼠臨床觀察：
　　正常對(duì)照組：自腹腔注射生理鹽水至實(shí)驗(yàn)結(jié)束大鼠活動(dòng)自如，反應(yīng)靈敏，自由飲食，大小便正常，全部存活。
　　ALF模型組：自造模完成后大鼠逐漸出現(xiàn)進(jìn)食減少，拒食，精神萎靡、嗜睡、昏迷，反應(yīng)遲鈍，自主活動(dòng)

4、減少，腹部膨隆，可見明顯胃腸型等肝性腦病及胃腸障礙的表現(xiàn)。
　　2.ALF模型組與正常對(duì)照組肝功能比較
　　與正常對(duì)照組比較，ALF模型組大鼠24h、36h、48h各時(shí)間點(diǎn)ALT、AST、TBIL均明顯升高[ALT(U/L)24h：346.81±127.04/50.15±11.94，36h：182.07±72.52/50.24±11.51，48h：98.36±31.84/49.82±9.78；AST(U/L)24h：1311

5、.25±552.20/161.26±36.49，36h：744.64±290.00/164.33±39.91，48h：440.66±123.93/165.20±42.81；TBIL(mmol/L)24h：6.54±2.32/3.79±1.15，36h：8.45/3.38/3.75±1.12，48h：13.20±4.45/3.76±1.22]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.01)，且ALF模型組大鼠血清ALT、AST水平隨時(shí)間呈逐漸降低趨勢

6、，TBIL水平隨時(shí)間呈逐漸升高趨勢，出現(xiàn)“膽酶分離”。
　　3.ALF模型組大鼠與正常對(duì)照組大鼠血清I-FABP、MTL、GAS比較
　　與正常對(duì)照組比較，ALF模型組大鼠血清I-FABP(ng/L)水平各時(shí)間點(diǎn)均明顯升高(24h：14.41±5.07/10.48+2.29，36h：18.60±5.57/10.46±4.14，48h：22.63±6.86/9.60±3.67)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；且ALF模型組

7、大鼠48h時(shí)血清I-FABP水平較24h明顯升高(P<0.01)；各時(shí)間點(diǎn)ALF模型組大鼠MTL(ng/L)水平較正常對(duì)照組大鼠明顯下降(24h：135.50±30.15/265.10±44.35，36h：125.84±42.00/253.19±49.18，48h：144.19±40.74/262.70±58.48)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；各時(shí)間點(diǎn)ALF模型組大鼠GAS(ng/L)水平較正常對(duì)照組大鼠明顯升高(24h：2.1

8、5±0.88/1.45±0.48，36h：2.37±0.89/1.52±0.48，48h：3.45±1.57/1.58±0.83)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；且ALF模型組大鼠48h時(shí)血清GAS水平較24h明顯升高(P<0.01)。
　　4.兩組大鼠肝臟組織及胃、十二指腸組織病理變化
　　正常對(duì)照組大鼠肝臟和胃及十二指腸組織光鏡觀察均未見異常。
　　ALF模型組大鼠肝組織結(jié)構(gòu)不清，肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂，可見肝細(xì)胞高度

9、水腫，氣球樣變，匯管區(qū)炎細(xì)胞浸潤，以中央靜脈為中心的肝細(xì)胞壞死(灶狀壞死及大片壞死)明顯；胃及十二指腸腸壁可見黏膜上皮細(xì)胞壞死脫落，絨毛壞死脫落。
　　結(jié)論：
　　1.本實(shí)驗(yàn)兩次間隔24h腹腔注射TAA(生理鹽水配成40g/L)350mg/Kg成功制備出急性肝衰竭并發(fā)胃腸功能障礙大鼠模型。
　　2.急性肝衰竭大鼠血清I-FABP水平顯著升高，與相關(guān)報(bào)道一致，提示I-FABP可作為急性肝衰竭胃腸黏膜缺血及胃腸功能障礙的監(jiān)