老齡ApoE基因敲除小鼠主要?jiǎng)用}血管病理學(xué)研究.pdf

1、目的:
　　 在現(xiàn)代生命科學(xué)研究中，基因工程小鼠已成為人類疾病動(dòng)物模型研究的重要來源。基因工程小鼠對(duì)于研究人類疾病的發(fā)生、發(fā)展及治療具有很高的應(yīng)用價(jià)值。用轉(zhuǎn)基因或基因敲除方法制作的人類疾病動(dòng)物模型在科學(xué)研究應(yīng)用前，必須對(duì)其生物學(xué)性狀進(jìn)行深入細(xì)致的研究。其生物學(xué)性狀的研究是基因工程動(dòng)物使用前必須具備的基礎(chǔ)條件，這些研究也是當(dāng)前動(dòng)物模型研究的重點(diǎn)內(nèi)容之一。
　　 載脂蛋白E(apolipoprotein E ApoE)基因敲

2、除小鼠是較為公認(rèn)的動(dòng)脈粥樣硬化(AS)病變以及易損斑塊機(jī)制研究的重要?jiǎng)游锬Ｐ椭?。通過給ApoE基因敲除小鼠(ApoE-/-小鼠)飼喂高脂飼料，研究AS的動(dòng)物模型應(yīng)用較多。但作為AS的ApoE-/-小鼠，飼喂普通飼料至老齡時(shí)，其相關(guān)生物學(xué)性狀的特征及數(shù)據(jù)未見詳盡報(bào)道。本研究通過給ApoE-/-小鼠飼喂普通飼料至18月齡時(shí)，觀察其冠狀動(dòng)脈、腦基底動(dòng)脈、頸動(dòng)脈、腹主動(dòng)脈、腎動(dòng)脈等血管及肝臟的病理變化情況，同時(shí)對(duì)與AS相關(guān)的部分血液生化和敏感

3、性指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。這些數(shù)據(jù)的獲得可為ApoE-/-小鼠飼喂普通飼料至老齡時(shí)的血管病理變化提供基礎(chǔ)背景資料。給使用ApoE-/-小鼠的科研工作者提供參考。
　　 方法:
　　 選取2月齡雄性ApoE-/-小鼠8只，同齡同性別C57BL/6J小鼠8只，飼養(yǎng)于山西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心屏障環(huán)境設(shè)施內(nèi)，環(huán)境溫度為20-23℃；濕度為45-55％；光照實(shí)行12h更替。飼喂經(jīng)高溫高壓滅菌處理的普通飼料至18月齡。選取主要?jiǎng)用}血管及肝臟進(jìn)

4、行HE染色，運(yùn)用圖像分析系統(tǒng)( Image Pro Plus5.1)對(duì)HE染色結(jié)果進(jìn)行分析、處理。
　　 動(dòng)物腹主動(dòng)脈抽取全血，利用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè):總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇( LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)。
　　 利用酶標(biāo)儀測(cè)定:血清高敏C反應(yīng)蛋白( hs-CRP)的含量、肝臟過氧化物酶體增殖物激活受體( PPAR)的相對(duì)表達(dá)；
　　 所有統(tǒng)計(jì)學(xué)資料均使用SP

5、SS13.0軟件分析，所有數(shù)據(jù)以(x)±s表示，組間比較采用單因素方差分析。
　　 結(jié)果:
　　 兩組小鼠飼喂普通飼料至18月齡時(shí)，均無死亡。ApoE-/-小鼠采食量相對(duì)減少，被毛凌亂:C57BL/6J小鼠個(gè)別出現(xiàn)脫毛癥狀。兩組動(dòng)物的血管和肝臟經(jīng)HE染色后，光鏡觀察顯不:ApoE-/-小鼠冠狀動(dòng)脈、腦基底動(dòng)脈未見動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成，頸動(dòng)脈、腹主動(dòng)脈、腎動(dòng)脈有明顯的AS斑塊的形成；肝臟組織可見部分中央靜脈周圍有脂質(zhì)沉積

6、。C57BL/6J小鼠各部位血管及肝臟病理顯示均正常。
　　 血脂結(jié)果顯示:TC(2.03±0.25 vs13.82±2.73 mmol/l P＜0.05)、LDL-C(0.20±0.08 vs1.88±0.76 mmol/l P＜0.05), HDL-C(1.52±0.13 vs0.62±0.20 mmol/l P＜0.05)的統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義。血漿TG(2.02±0.34 vs l.58±0.68 mmol/l P>0.05)統(tǒng)

7、計(jì)學(xué)無意義。
　　 血清hs-CRP含量(5.61±0.33 vs6.80±0.38ug/l P＜0.01)，肝臟PPAR相對(duì)表達(dá)(247.62±21.74 vs339.43±30.07ng/l P＜0.01))的統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義
　　 結(jié)論:
　　 ApoE-/-小鼠冠狀動(dòng)脈、腦基底動(dòng)脈未見AS斑塊的形成，表明該模型飼喂普通飼料不適合用于腦和心臟動(dòng)脈粥樣硬化病變方面的研究。
　　 ApoE-/-小鼠頸動(dòng)脈、