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文檔簡介
1、目的:觀察小干擾RNA(smallinterferingRNA,siRNA)抑制血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表達(dá)對裸鼠皮下人舌癌Tca8113細(xì)胞移植瘤的治療作用。 方法:構(gòu)建人舌癌Tca8113細(xì)胞20只裸鼠皮下移植瘤模型,隨機(jī)分為4組。將兩對針對VEGF的siRNA真核表達(dá)載體(Pu-VEGF-siRNA1,Pu-VEGF-siRNA2)脂質(zhì)體法作瘤體內(nèi)及瘤周注
2、射;以注射空質(zhì)粒組作實驗對照組;未注射組作空白對照組。觀察各組裸鼠腫瘤生長情況。注射每3天1次共10次,最后1次注射3天后測量瘤體積,剝離瘤體并稱重,流式細(xì)胞儀檢測腫瘤細(xì)胞懸液的細(xì)胞周期比例,RT-PCR檢測瘤組織VEGF-mRNA表達(dá),免疫印跡技術(shù)(Westernblot)檢測瘤組織VEGF蛋白表達(dá)。免疫組織化學(xué)法觀察VEGF陽性染色及微血管密度,Tunel法觀察組織細(xì)胞凋亡。 結(jié)果:Pu-VEGF-siRNA2組移植瘤體積和
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