基于固定化漆酶催化的光纖腎上腺素傳感器研究.pdf

1、腎上腺素具有調(diào)節(jié)肝臟、骨骼肌及脂肪組織的分解代謝、影響人體肌肉中葡萄糖及蛋白質(zhì)代謝的作用，同時(shí)能夠促使肝糖原分解，加強(qiáng)機(jī)體應(yīng)付意外情況的能力。由于腎上腺素與人們的健康密切相關(guān)，因此可以通過(guò)對(duì)人體內(nèi)腎上腺素的檢測(cè)對(duì)多種疾病進(jìn)行早期診斷與預(yù)測(cè)。正常情況下血漿，尿液中的腎上腺素的濃度很低，同時(shí)由于樣品前期處理復(fù)雜和受檢測(cè)儀器靈敏度的限制，現(xiàn)階段對(duì)腎上腺素的檢測(cè)往往難以滿(mǎn)足臨床診斷和基礎(chǔ)研究的需要，因此非常迫切需要開(kāi)發(fā)新型的腎上腺素傳感器。

2、 有機(jī)-無(wú)機(jī)納米復(fù)合材料是一個(gè)新興的多學(xué)科交叉的研究領(lǐng)域，由于其結(jié)構(gòu)特殊、性能優(yōu)異而展現(xiàn)出誘人的應(yīng)用前景，近期已成為材料學(xué)中的研究熱點(diǎn)。在本文中我們制備了有機(jī)-無(wú)機(jī)納米復(fù)合粒子固定化漆酶，用該固定化酶構(gòu)建了基于漆酶催化的熒光猝滅型光纖腎上腺素生物傳感器，并研究了其傳感特性。 本學(xué)位論文在以下幾個(gè)方面進(jìn)行了系統(tǒng)的研究： (1)利用原位復(fù)合法制備了ZnTAPc-Fe<,3>O<,4>納米復(fù)合粒子。對(duì)所得的粒子利用紅外、振

3、動(dòng)樣品磁強(qiáng)計(jì)、掃描電鏡等進(jìn)行表征。所得到的納米復(fù)合粒子的平均粒徑可達(dá)到15nm左右，接近超順磁性，分散性好，有良好的生物相容性，而且表面有大量活性官能團(tuán)(-NH<,2>)，是一種優(yōu)良的載體材料。 (2)以ZnTAPc-Fe<,3>O<,4>納米復(fù)合粒子為載體通過(guò)交聯(lián)法固定了血紅密孔菌真菌漆酶，研究了戊二醛的濃度、牛血清白蛋白的濃度、反應(yīng)過(guò)程中的pH值、漆酶的用量等因素對(duì)固定化漆酶活性的影響，以ABTS為底物固定化漆酶的最佳使用溫

4、度為0℃，最佳使用pH值為3，Km值為20.1μM，比游離酶略大(12.6μM)。固定化漆酶具有較好的熱穩(wěn)定性、貯存穩(wěn)定性和操作穩(wěn)定性。 (3)設(shè)計(jì)和構(gòu)建了基于熒光猝滅效應(yīng)的光纖腎上腺素生物傳感器測(cè)試系統(tǒng)，以固載在ZnTAPc-Fe<,3>O<,4>納米復(fù)合粒子上的固定化漆酶為催化劑，ABTS為介體，研究漆酶-介體體系滯后相移曲線(xiàn)的變化。在光纖腎上腺素生物傳感器中固定化酶的活力、ABTS的濃度都對(duì)腎上腺素的檢測(cè)范圍有影響，選擇適