Eotaxin在皮膚過敏性疾病中的表達調控及苦參方提取物與eotaxin siRNA的經皮治療研究.pdf

1、皮膚過敏性疾病是高發(fā)的變態(tài)反應型疾病，是當皮膚暴露于外界過敏原時，由全身免疫系統(tǒng)參與而癥狀產生于局部的病理過程。除了在普通人群中常見外，對于在邊防、海島等惡劣環(huán)境下進行工作與生活的部隊官兵，特別如遇戰(zhàn)事、災害等嚴峻情況，影響尤為嚴重。因此，深入探討皮膚變態(tài)反應性疾病的病理過程與機制，發(fā)現新的藥物作用靶點和新的治療藥物，具有重要的科學價值與軍事意義。
　　 變態(tài)反應型疾病發(fā)病的確切機制目前仍不十分清楚，但炎癥細胞的募集是最終導致過

2、敏性炎癥發(fā)生和發(fā)展原因。嗜酸粒細胞(eosinophils，Eos)是過敏性疾病中重要的效應細胞，其浸潤于過敏部位，釋放毒性蛋白，造成組織損傷，導致炎癥發(fā)生。造成Eos局部浸潤的最重要的趨化因子是嗜酸粒細胞趨化因子(eotaxin/CCL11)，因此eotaxin的表達與調控是過敏性疾病的重要環(huán)節(jié)和藥物治療靶點。
　　 Eotaxin參與了皮膚過敏性疾病(如特異性皮炎、接觸性皮炎、藥物過敏性皮膚疾病等)的進程已得到證實。而人體皮

3、膚由表皮、真皮和皮下組織構成，eotaxin在過敏皮膚中的確切表達部位及表達的動態(tài)過程目前還沒有證實。本研究中，我們以小鼠接觸性皮炎(ACD)模型為基礎，探討了eotaxin在過敏環(huán)境下皮膚中的表達部位及動態(tài)特征。同時對皮膚過敏反應的免疫學特征進行了觀察，我們對CD4+和CD8+T淋巴細胞的浸潤的程度和時程進行了比較。此外，為了闡明eotaxin表達的調控機制，我們以構成表皮層的角質形成細胞(KC)株HaCaT細胞和構成真皮層的真皮成纖

4、維細胞(FBs)為基礎，使用TNF-α和IL-4刺激兩種細胞，觀察eotaxin分泌量的改變，并檢測與兩種因子相關的轉錄因子NF-κB和STAT6的激活情況，探討eotaxin表達的轉錄機制。
　　 皮膚過敏性疾病的治療是本課題關注的重要內容。相對于化學藥物治療，傳統(tǒng)藥物更顯示出開發(fā)成本低、療效好、副作用少、重視免疫平衡等優(yōu)點?？鄥⒎綖橐恢委熯^敏性皮膚病的傳統(tǒng)中醫(yī)藥方劑，其提取物的主要成份為苦參堿(Mat)、氧化苦參堿(Omt)

5、、槐果堿(Sop)、氧化槐果堿(Osp)以及荊芥揮發(fā)油(SVO)。我們考察了苦參方提取物(KS)凝膠劑對小鼠接觸性皮炎的治療效果，同時檢測其對eotaxin的抑制作用，并于細胞水平對其提取物抑制TNF-α和IL-4誘導的eotaxin表達的信號轉導機制進行進一步闡述。
　　 基因治療是目前疾病治療的一個研究熱點，我們嘗試性地對皮膚過敏性疾病的經皮基因治療進行了探索。微乳是經皮給藥的一個良好劑型，將經穩(wěn)定性修飾的eotaxin特異

6、性siRNA制成W/O型微乳劑型，經皮給藥，觀察其對小鼠接觸性皮炎治療效果及對eotaxin的在皮膚組織中表達的抑制作用。
　　 第一部分：Eotaxin在皮膚過敏性疾病中的表達調控
　　 (一)Eotaxin在小鼠接觸性皮炎(ACD)中的表達規(guī)律研究。
　　 (二)Eotaxin在皮膚細胞中產生的調控機制研究。
　　 第二部分：苦參方提取物小鼠接觸性皮炎的治療作用及對eotaxin抑制作用研究
　

7、　 (一)苦參方提取物(KS)治療小鼠ACD的療效及機制研究。
　　 (二)KS抑制皮膚細胞中eotaxin表達機制研究。
　　 第三部分：Eotaxin特異siRNA微乳治療小鼠接觸性皮炎初步研究
　　 通過本課題的研究，進一步證實了eotaxin在過敏性皮膚疾病病理過程中的重要意義，揭示了eotaxin在過敏性皮膚疾病中的表達規(guī)律及調控機制。證明了中藥方劑苦參方治療過敏性皮膚疾病的治療效果和作用機制。初步探